痢疾杆菌脂多糖抗独特型单克隆抗体作为疫苗的进一步研

将纯化的宋内痢疾杆菌脂多糖的鼠单抗（5B12）固相比，然后对混合噬菌体抗体库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的淘筛，使特异性抗体得到了富集，阳性率达53.13%。竞争抑制试验证明，其中6株与宋内痢疾杆菌脂多糖的竞争抑制率大于50%。酶切电泳图谱显示，淘筛的阳性克隆只含重链基因约400bp。序列分析证明它为人免疫球蛋白重链可变区序列。属人IgG基因Ⅲ家族。将些重链可变区基因克隆到PGEX2T载体内，转化DHS2，获得高效表达，表达量占全菌总蛋白的40%，表达出的融合蛋白分子量为40KDa。将此融合蛋白包涵体变性、复性后通过各胱甘肽亲和层折柱得到电泳纯的蛋白，每升培养物能纯化到20-30mg。Western Blet分析证明5B2单抗能特异结合到40KDa的融合蛋白的带上。