放射诱导启动子介导PUMA基因沉默与AQP基因表达防治放射性口干的实验研究

放射性口干是头颈部放疗最常见并发症，可继发龋病、骨髓炎等疾患，严重影响患者生存质量。PUMA 是Bcl-2家族新成员，是放疗引起细胞凋亡过程中的关键蛋白，而AQP基因则与细胞膜水转运功能密切相关。本课题组已合成放射诱导启动子，并证实可用作调控基因表达的分子开关。在此基础上，本研究拟构建由放射诱导启动子调控的PUMA-RNAi 系统及由该启动子介导AQP基因表达的质粒，以纳米微球为载体，联合细胞保护剂阿米福汀经导管系统逆行导入小型猪腮腺组织，放疗时通过放射线照射启动PUMA 基因沉默和AQP基因表达。利用阿米福汀清除放疗产生的自由基，降低放射线对腺体损伤；PUMA-RNAi抑制PUMA蛋白的表达，减少细胞凋亡；上调腮腺细胞AQP基因表达水平增强其水排泄功能。本研究将基因治疗与放疗有机结合，防治并举，减少放射线对腺体组织的损伤同时增强剩余腺体组织水排泄功能，从根本上改变放射性口干防治策略。

放射性口干是头颈部放疗最常见并发症，可继发龋病、骨髓炎等疾患，严重影响患者生存质量。PUMA 是Bcl-2家族新成员，是放疗引起细胞凋亡过程中的关键蛋白，而AQP基因则与细胞膜水转运功能密切相关。本课题组在国家自然科学基金的资助下，按计划开展实验完成以下工作：（1 ）成功合成人工放射诱导启动子，并证实可用作调控基因表达的分子开关；放射诱导该启动子上调PUMA基因的mRNA及蛋白水平表达。（2） 检测PUMA蛋白与SLUG蛋白在腮腺组织中的表达以及放射治疗对其表达的影响，放射线照射明显增强腮腺组织PUMA蛋白，促进细胞凋亡。（3 ）观察发现胞保护剂阿米福汀对放射性口干有明显的防护作用，对原发灶放疗疗效无明显影响。（4）利用 PUMA-RNAii抑制腮腺细胞PUMA蛋白的表达，减少细胞凋亡。（5 ） 携AQP基因的质粒转染上调腮腺细胞AQP基因表达水平，增强其蛋白表达，有望增强其水排泄功能。本研究将基因治疗与放疗有机结合，减少放射线对腺体组织的损伤，增强剩余腺体组织水排泄功能，为放射性口干防治提供新策略。本研究部分相关结果发表科研论文8篇，其中外文2篇，SCI收录1篇，同时培养硕士研究生毕业一名，资助课题组成员参加国际会议一次，国内学术会议2次。资助项目负责人赴美国芝加哥大学进行相关研究3个月。