协同活化TLR4和TLR9的靶向DC疟疾红外期脂质体疫苗的研究

红外期疫苗能从源头控制疟原虫的感染和防止疟疾的复发，然而，目前尚无有效的红外期疫苗问世，这与现有红外期疫苗不能有效活化疟原虫特异性CD8+T细胞和促进记忆性T细胞的扩增和分化有关。我们前期研究发现，TLR9激动剂CpG与红外期主要保护性抗原CSP偶联物CpG-CSP能诱导小鼠产生完全保护性免疫，只能持续3个月左右。鉴于TLR4与TLR9激动剂能协同抗原特异性CD8+T细胞的活化，并能诱导记忆性CD8+T细胞的增殖和分化，而DC靶向能进一步增强CD8+T细胞的活化。因此，本项目利用脂质体制备技术，构建能协同活化TLR4和TLR9受体并靶向DC的疟疾脂质体疫苗，观察能否促进Th1极化和CD8+T细胞的活化以及记忆性CD8+T细胞的增殖和分化，诱导小鼠产生持久的抗子孢子感染的保护性免疫应答。这不但有望设计出有效的红外期疟疾疫苗，而且可为其他旨在诱导CD8+T细胞的病毒和肿瘤疫苗的设计提供新思路。

设计有效的红外期疟疾亚单位疫苗一直疟疾疫苗研制领域的热点。本研究利用热休克蛋白gp96能促使其结合蛋白交叉递呈到MHCⅠ，并活化CD8+ T细胞的优点，与红外期主要保护性抗原CSP的全长序列进行重组，成功构建了疟疾红外期核酸疫苗pFLAG CMV8 gp96NTD-CSP，结果发现其不但能活化CSP特异的CD8+T细胞，而且能诱导CSP特异性抗体的产生，并诱导小鼠产生一定抗野生子孢子攻击的保护性免疫。另外，本项目还利用基因敲除技术，成功构建了伯氏疟原虫遗传减毒子孢子，可为今后深入探讨红外期疫苗保护性免疫机制奠定基础，为设计有效的红外期亚单位疫苗提供重要的理论依据。