针对Th17细胞的重组免疫毒素治疗小鼠EAE

特异性免疫治疗一直备受关注，有望成为治疗神经系统自身免疫性疾病的新突破口。研究证明，CD4+ Th17细胞的分化增殖是引起实验性自身免疫性性脑脊髓炎（EAE）等动物神经系统自身免疫病的关键因素。IL-23参与 Th17细胞的大量产生和存活。因此，我们拟以Th17细胞表面特异性表达的膜受体IL-23R为靶点，IL-23特有的p19亚基为导向分子、白喉毒素活性片段DT390为毒素分子，构建重组免疫毒素IL-23p19-DT390真核表达质粒，用阳离子脂质体包被，对诱导EAE的C57BL/6小鼠肌肉注射该包被裹质粒，通过机体自身合成免疫毒素IL-23p19-DT390有效攻击体内Th17细胞，达到预防及治疗EAE目的。该靶点在国内外具有较强新颖性，有充分的立论依据和成熟的技术路线，通过本课题研究，有望获得一种新的特异性高、毒副作用低的重组免疫毒素，具有重要的理论意义和良好的应用前景。

摘要：.特异性免疫治疗一直备受关注，有望成为治疗神经系统自身免疫性疾病的新突破口。研究证明，CD4+Th17细胞的分化增殖是引起实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）等动物神经系统自身免疫病的关键因素。Il-23参与Th17细胞的大量产生和存活。因此，我们以Th17细胞表面特异性表达的膜受体IL-23R为靶点，IL-23特有的p19亚基为导向分子、白喉毒素（diphtheria toxin，DT）活性片段DT390为毒素分子，成功构建了重组免疫毒素IL-23p19-DT390真核表达质粒。该重组质粒可在真核细胞NIH3T3中瞬时表达，表达的IL-23p19-DT390对活化T细胞具有明显的细胞毒作用。用阳离子脂质体包被质粒，对诱导EAE的C57BL/6 小鼠肌肉注射该包被质粒，使其在骨骼肌内高效表达重组蛋白，通过机体自身合成的免疫毒素有效攻击体内Th17细胞，达到了预防和治疗EAE的目的。IL-23p19-DT390核酸制剂处理后的EAE模型小鼠临床症状得到明显改善：发病延迟、症状严重程度降低、平均临床评分下降；脑部神经组织的炎性细胞浸润减轻。相应的检测指标提示免疫毒素IL-23p19-DT390的核酸制剂可有效的防治EAE。