LXRα/SREBP-1c通路对NAFLD肝细胞、Kupffer细胞脂质代谢相关基因的调控机制及疏肝健脾方药的干预作用

脂质代谢紊乱是非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）最基本最关键的病理环节之一，LXRα/SREBP-1c通路在脂质代谢中占有重要地位。本项目以NAFLD大鼠为研究对象，以LXRα/SREBP-1c通路对肝细胞、Kupffer细胞脂质代谢相关基因的调控作用为切入点。目的：①体内动态观察肝细胞、Kupffer细胞LXRα/SREBP-1c通路对脂质代谢相关基因的调控及疏肝健脾方药的干预作用；②体外动态观察脂肪酸诱导脂肪变性肝细胞、Kupffer细胞LXRα/SREBP-1c通路对脂质代谢相关基因调控及疏肝健脾方含药血清的干预作用。预期：①明确LXRα/SREBP-1c通路在NAFLD病理演变过程中对相关脂质代谢基因的调控机制；②揭示疏肝健脾方药对NAFLD肝细胞、Kupffer细胞 LXRα/SREBP-1c通路脂质代谢相关基因的干预作用，为中医药防治NAFLD提供新的研究思路和方法。

目的：探讨疏肝健脾方药对NAFLD大鼠肝细胞、kupffer细胞LXRα/SREBP-1c通路脂质代谢相关基因及蛋白的调控作用。方法：高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD动物模型，同时给予疏肝、健脾、综合不同方药干预8周，Ⅳ型胶原酶灌注肝脏，差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得肝细胞、Kupffer细胞，Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定；实时定量PCR法检测Kupffer细胞LXRα、SREBP1-c、FAS、SCD-1 mRNA的表达水平; Western blot法检测肝细胞、Kupffer细胞LXRα、SREBP1-c、FAS、SCD-1蛋白水平。结果：与正常组比较，模型组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C均有不同程度升高（P＜0.01），与模型组相比，疏肝组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C均有不同程度降低（P＜0.01 P＜0.05），健脾组与合方组TC、LDL-C均有不同程度降低（P＜0.01）；与正常组比较，模型组肝组织TC、TG明显升高（P＜0.01），与模型组相比，疏肝组肝组织TC、TG均有不同程度下降（P＜0.05）。结论：肝郁脾虚且以肝郁偏重可能是8周阶段NAFLD的重要病机，疏肝剂量药物能显著抑制NAFLD大鼠肝组织、肝细胞及Kupffer细胞LXRα/SREBP-1c信号通路的活化，这可能是疏肝健脾方药显著改善NAFLD大鼠肝细胞脂肪肝变、脂质代谢紊乱病理变化的重要机制，同时也可能是上述方药发挥作用的有效靶点。目前已完成该项目的研究工作，部分资料正在整理统计处理之中，待发表论文3篇。