EREG基因在涎腺腺样囊性癌侵袭转移中的作用及机制研究

Salivary adenoid cystic carcinoma (SACC) is one of common salivary gland malignancy with local invasion and high propensity of local recurrence and distant metastasis. The underlying mechanism of this biological characteristics needs to be further clarified for the benefits of clinical treatment. EREG gene is a member of epidermal growth factor family and may be associated with tumor metastasis. Our research group initially observed that the expression of EREG gene is up-regulated in the highly lung metastatic cell line SACC-LM as compared with low lung metastatic cell line SACC-83 by gene chip technology. The invasion and metastasis of SACC cell is promoted after adding exogenous epiregulin(2nM). To study the endogenous up-regulated/down-regulated expression of EREG in SACC cells, we intend to contruct the expression plasmid/RNAi plasmid of EREG. Through the transfection of it into SACC cells, the mechanisms of biological behaviors changes in those cells, as well as its lung metastatic ability will be unravelled. Finally, we also want to examine the effect and mechanism of up-regulation expression of EREG on the immune evasion of SACC cells. This research will prove our speculation that EREG is a functional gene in the promotion of SACC invsion and lung metastsis for potential therapeutic target and a novel prognostic marker of SACC.

涎腺腺样囊性癌（SACC）是发生在涎腺最常见的恶性肿瘤之一，极易发生远处肺转移，其机制尚未彻底阐明。EREG基因编码表皮调节素（epiregulin）是表皮生长因子家族中的一员，可能与肿瘤转移有关。本课题组首先发现EREG在肺高转移SACC细胞系中存在明显的上调，加入外源性epiregulin（2nM）可以促进SACC细胞侵袭、转移。本课题拟继续对epiregulin在细胞的内源性表达改变进行研究，通过构建EREG表达质粒/RNAi质粒并转染SACC细胞，内源性升高或降低epiregulin的表达，观察SACC细胞生物学行为的改变以及对体内肺转移的影响及机制；同时对epiregulin上调对SACC细胞免疫逃逸的影响及机制进行研究。本研究将证明我们的推测：EREG是一个表达上调具有促进SACC侵袭及肺转移的功能性基因，并有可能作为靶向SACC侵袭转移治疗的一个分子靶标及预后标志。

背景：唾液腺腺样囊性癌晚期肺转移是影响病人生存率的主要因素。Epiregulin为表皮生长因子家族中的一员，对不同种类细胞的生长具有调节作用。另有研究表明肿瘤细胞分泌的外泌体能够影响肿瘤的微环境，进而促进肿瘤细胞的侵袭和转移，但外泌体及富含epiregulin的外泌体在唾液腺腺样囊性癌肺转移的作用仍不明确。内容：1、探究epiregulin表达水平与病人临床病理特征之间的关系。2、腺样囊性癌细胞中epiregulin在细胞迁移、侵袭及体内肺转移过程中的作用。3、探讨来源于腺样囊性癌细胞的外泌体对肿瘤细胞增殖能力、迁移能力的影响及其在血管生成、血管通透性过程中的作用。4、探究epiregulin及包含epiregulin的外泌体在血管生成及血管通透性过程中的作用。5、探讨包含epiregulin的外泌体在转移前微环境形成过程中的作用。结果：1、腺样囊性癌组织中epiregulin表达水平高于下颌下腺组织；epiregulin表达水平较高的腺样囊性癌组织易发生肺转移和复发，且病人的生存率较低。2、腺样囊性癌细胞过表达epiregulin后，细胞迁移和侵袭能力、体内肺转移能力升高；唾液腺腺样囊性癌细胞敲低epiregulin后，细胞迁移和侵袭能力降低；腺样囊性癌细胞中epiregulin可能参与GLI1-E-cadherin信号通路。3、来源于腺样囊性癌细胞的外泌体能够促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭；外泌体促进体内和体外血管生成，提高血管通透性，进而促进腺样囊性癌细胞肺转移。4、人重组蛋白epiregulin促进内皮细胞血管生成，提高内皮细胞通透性；包含epiregulin的外泌体引起内皮细胞中proepiregulin的表达水平升高并促进血管生成，提高血管通透性，进而促进腺样囊性癌细胞肺转移。5、包含epiregulin的外泌体能够提高鼠肺中VEGFR1的表达水平，并促进鼠肺内皮细胞中VEGFA、FGF-2和IL-8 mRNA的表达。结论：研究表明epiregulin及富含epiregulin的exosomes可促进唾液腺腺样囊性癌的肺转移，有可能成为唾液腺腺样囊性癌的治疗靶标。