蛋白L-异天冬氨酰甲基转移酶1在糖尿病血管重构中的作用机制及葡萄子原花青素干预研究

糖尿病血管重构（VR）既是糖尿病时血管的病理改变，又是发生慢性血管并发症的结构基础。血管内皮细胞（VEC）过度凋亡是内皮功能障碍和损伤的重要机制，是糖尿病VR的重要原因。我们通过前期蛋白质组学、分子生物学研究，已初步确定蛋白L-异天冬氨酰甲基转移酶1（PIMT1）在调控VEC过度凋亡及VR中具有重要作用。本研究旨在探讨PIMT1在糖尿病VR中的分子调控机制及葡萄子原花青素（GSPE）干预作用，通过建立VEC糖基化损伤模型，应用PIMT RNAi和PIMT1过表达载体及GSPE干预，阐明PIMT1在VEC糖基化损伤和过度凋亡中的分子调控机制；以GK大鼠为2型糖尿病模型，通过PIMT1表达载体和GSPE干预，结合形态学、分子生物学和动脉功能检测技术检测糖尿病VR发生发展及分子机制，对阐明PIMT1在糖尿病VR中分子机制和GSPE作用靶点具有重要理论意义，对涉及VR疾病防治具有巨大的应用价值。

本研究从细胞、动物实验两个层面探讨了蛋白L-异天冬氨酰甲基转移酶（PIMT）在血管内皮细胞糖基化损伤和糖尿病小鼠动物模型主动脉血管重构中的分子机制和天然药物葡萄籽原花青素B2（GSPB2）的保护作用。研究发现：（1）糖化低密度脂蛋白（glyLDL）刺激HUVEC后，显著增加细胞凋亡，同时抑制PIMT蛋白的表达，应用GSPB2 (2.5, 5.0, 10.0 µmol/L)预孵育后，能够显著抑制内皮细胞的凋亡，并且剂量依赖性的增加PIMT的表达。（2）PIMT siRNA增加内皮细胞的凋亡，EGFP-PIMT过表达后，能够显著抑制glyLDL诱导内皮细胞糖基化损伤，揭示了PIMT在内皮细胞糖基化损伤中具有重要作用，其机制可能与调控P53、磷酸化ERK1/2和GSK3β等信号通路有关。（3）db/db小鼠转染PIMT RNAi后，增加主动脉血管重构病变，而应用PIMT过表达载体和GSPB2干预组，主动脉血管重构较对照组明显减轻。上述结果表明PIMT在血管内皮细胞糖基化损伤和糖尿病血管重构中具有重要的作用，天然药物GSPB2在糖尿病血管病变的防治中具有重要的意义。