白细胞介素3,6融合基因在小鼠体内的持续高效表达

从人外周血分离获得单个核细胞，与脂多糖共孵育48小时，提取总mRNA，经逆转录反应及巢式PCR，获得IL-6cDNA双链。将该片段与质粒经限制性内切酶酶切后连接，构成重组质粒。经限制性内切酶酶切片段及双脱氧链终止法进行序列分析，确证所得确系目的重组质料。实验小鼠体内生物学活性检测。对实验小鼠分组分别注射CTX，CTX+rhIL-6，发现IL-6+CTX组与CTX组造血面积间有极显著性差异（P<0.001），并且前者外周血白细胞减少的幅度小。表明rhIL-6对受化疗损伤的造血组织确有保护作用。对于IL-3的克隆，经多次重复实验，均未获得IL-3cDNA，可能是由于人外周血单个核细胞经利激后转录的mRNA量过少或产生后被迅速降解。由于IL-3重组质粒构建失败无法按原计划进行IL-3和IL-6基因的融合等实验。