肝星状细胞血管紧张素II功能相关新基因的克隆表达及功能研究

本研究利用分子克隆技术，（1）通过培养大肠杆菌和酵母体外表达血管紧张素II的2个功能相关新基因的蛋白；（2）利用变性电泳技术、Western blot等基本分子生物学手段对表达的新蛋白进行鉴定，并免疫动物制备相应的多克隆抗体，然后利用组织化学技术对表达的血管紧张素II功能相关蛋白在细胞和肝组织内分布特征的进行观察；（3）利用siRNA技术探讨诱导血管紧张素II功能相关基因沉默后，培养的肝细胞系HepG2、肝星状细胞系LX2增殖、分化、凋亡、以及细胞外基质表达的变化；据此探讨血管紧张素I个年相关蛋白在细胞增殖、分化等过程中的可能作用；（4）利用酵母双杂交技术筛选血管紧张素II功能相关蛋白的结合蛋白，以推测血管紧张素II功能相关蛋白可能的作用机制。通过本研究阐述肝星状细胞功能调控的机制，以期为肝纤维化发病机制研究奠定新的研究方向，为肝纤维化治疗药物的开发探索新的作用靶点。