云南优势中草药——重楼抗痤疮丙酸杆菌抗菌、抗炎机制及安全性初步研究

Acne is a common and relapsing skin disease, and the morbility of the condition in Yunnan province is higher than other parts of China. Infection and inflammination by Propinbacterium is regard as two main pathogenetic factors of acne. By now, antibiotic is one of predominant therapeutic tools to kill or inhibit Propinbacterium. The regimen has partly taken effect, but caused serious antibiotic resistance, moreover not completely cleaned the inflammination. A satisfactory drug should possess the following features ,namely anti-propinbacterium different from antibiotic, and anti-inflammination. Paridis has been universally regarded as a anti-bacterium and anti- inflammination herb. And Paridis in Yunnan is a prevalentf herbal medicine. Our previous research has proven that Paridis in Yunan can powerfully inhibit propinbacterium. .Thus, electron microscope, bacterium culture fluid conductivity, spectrophotometer and dehydrogenase will be used to evaluate Propinbacterium structure, cellular membrane permeability, adhesiveness and biological metabolism, respectively. The above efforts aim to explore the mechnism of anti-propinbacterium. And ELISA and fluorescent quantitation PCR will be used to detect level of IL-8 and TNF-a after Paridis effect on THP-1 cell activated by Propinbacterium, which aim to explore the mechnism of anti- inflammination. MTT will be taken to verify safety of Paridis on fibroblast and HaCat by detecting the cell’s proliferation. The study will provide elementary data for Paridis for treating acne.

痤疮多发、易反复。云南地理、气候等特点造成痤疮在本省更多发且重症患者更多。痤疮丙酸杆菌引起的感染和细菌抗原等诱发的免疫反应是痤疮发病中的两个关键环节。目前抗生素抑菌是痤疮治疗的主要手段之一，虽有一定效果，但易引起耐药，同时也不能完全消除痤疮炎症。理想的痤疮治疗应为不同抗菌机制药物联用、抗菌与抗炎并重。重楼是云南优势中草药，它具有不同于抗生素的抗菌作用及抗炎作用，是理想的痤疮治疗药物候选。我们的前期工作已证明它具有较好的抗痤疮丙酸杆菌作用。. 本研究拟分别通过电镜观察细菌结构、电导率测定评价细菌细胞膜通透性、分光光度计测定细菌黏附性和脱氢酶活性评价细菌生物代谢，初步探索重楼抗菌机制；ELISA和荧光定量PCR评价重楼对人单核细胞的IL-8和TNF-a的影响,明确其抗痤疮炎症的作用；利用MTT法观察重楼对人成纤维细胞和人角质形成细胞增殖的影响评价安全性，为痤疮药物开发奠定基础

痤疮多发、易反复。云南独特自然及民族等特点造成痤疮在本省发病率更高且重症患者更多。痤疮丙酸杆菌（P.A）引起的感染和细菌抗原等诱发的免疫反应是痤疮发病中的两个关键环节。目前抗生素抑菌是痤疮治疗的主要手段之一，虽有一定效果，但易引起耐药，也不能完全消除痤疮炎症。理想的痤疮治疗应为不同抗菌机制药物联用、抗菌与抗炎并重。重楼是云南优势中草药，它具有不同于抗生素的抗菌及抗炎作用，是理想的痤疮治疗药物候选。我们的前期工作已证明滇重楼具有较好的抗P.A作用。.分别通过电镜观察细菌结构、电导率测定评价滇重楼对P.A细胞壁及细胞膜通透性、分光光度计测定细菌黏附性和脱氢酶活性评价细菌生物代谢，初步探索滇重楼抗菌机制；ELISA和荧光定量PCR评价重楼对人单核细胞的IL-8和TNF-a的影响，明确其抗炎症作用；利用MTT法观察滇重楼对人成纤维细胞和人角质形成细胞增殖的影响评价安全性。同时系统分析了我们收集的云南地区痤疮皮损分离P.A的抗生素耐药情况，并系统回顾了我国P.A的耐药情况。.我们研究发现：滇重楼通过影响P.A细胞膜通透性、抑制P.A粘附力及氧化还原代谢达到抑菌效果；它能抑制THP-1分泌、表达IL-8和TNF-a，提示它可能对以THP-1为核心的痤疮炎症具有抑制作用；滇重楼在较高浓度（50微克/毫升）对角质形成细胞及成纤维细胞具有细胞毒性，说明在一定浓度范围内滇重楼具有具有较好的安全性。我们也发现对于痤疮患者四环素类仍是主要敏感药物，而甲硝唑耐药率较高。.通过本研究，初步发现了滇重楼抗P.A机制及作用靶点，这一靶点与抗生素有很大区别，也明确了滇重楼对以抗原递呈细胞为核心的痤疮炎症具有拮抗作用，它兼具抗菌及抗炎作用，此外它在一定浓度范围内安全性较好，滇重楼是痤疮治疗较好的候选药物。此外明确了云南及全国痤疮患者P.A耐药情况，对于临床合理使用抗菌药物具有较大的指导意义