c-Src促进鼻咽癌转移的作用与临床意义的研究

For nasopharyngeal carcinoma (NPC) patients, distant metastasis remains the major cause of treatment failure. Through analysing serum protein spectrum from different prognosis of NPC patients by high-throughput protein chip, we firstly found that serum c-Src concentration level was the independent predictor of poor DMFS of NPC patients, then the pre-test also confirmed that the expression of c-Src in tumor organization was related with patients clinical staging. In vitro, we found c-Src protein promote cell migration and invasion in NPC. So we make a scientific hypothesis: C-Src has the role of promoting metastasis of NPC and its expression levels can predict the prognosis of NPC patients. This project will explore, through high/low metastasis of NPC cell lines in vitro and metastasis model in nude mice and clinical specimens, that the relationships between c-Src and clinical characteristics/prognosis in NPC patients, explore the role of c-Src in NPC cells of epithelial to mesenchymal transition process, and to confirm that c-Src can promote the metastasis of NPC. Completion of this project will be to predict the prognosis of NPC patients, as well as provide new target of prevention and cure of NPC with distant metastasis.

远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因。我们通过高通量蛋白芯片分析不同预后的鼻咽癌患者血清蛋白谱，首次发现血清中c-Src浓度水平是鼻咽癌患者远处转移的预测指标；并且进一步的预实验也证实c-Src在鼻咽癌组织中的表达与患者临床分期呈正相关；在细胞实验中，我们发现c-Src可以促进鼻咽癌细胞的迁移和侵袭。因此我们提出科学假设：c-Src具有促进鼻咽癌转移的作用，并且其表达水平能够预测鼻咽癌患者的预后。本项目拟通过高/低转移鼻咽癌细胞株的体外研究、裸小鼠转移模型和临床标本检测，探讨c-Src与鼻咽癌患者的临床特征和预后的关系，研究c-Src对鼻咽癌细胞上皮－间叶表型转化过程的影响，证实c-Src具有促进鼻咽癌转移的作用。本项目的完成对预测鼻咽癌患者的预后具有重要意义，也将为防治鼻咽癌的远处转移提供新的靶点。

远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因，而c-Src活化（phospho-Src[Y419]; p-Src)在肿瘤进展中发挥重要的作用。本研究旨在探索p-Src在鼻咽癌进展中的作用及相关机制。我们通过高通量蛋白芯片分析首次发现血清中c-Src浓度水平是鼻咽癌患者远处转移的预测指标。1）本项目采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组化技术(IHC)等发现血清中的c-Src及鼻咽癌原发灶组织中的p-Src是鼻咽癌患者总生存率，无病生存率及无远处转移生存率的独立预后因素，原发鼻咽癌组织及其匹配的肝转移灶免疫组化结果显示p-Src在肝转移灶中染色更强且阳性细胞数更多，Western-blotting结果显示c-Src及phospho-Src(Tyr419)蛋白在鼻咽癌高转移细胞株中高表达，表明该蛋白活化与鼻咽癌转移密切相关。2）c-Src特异性磷酸化抑制剂PP2可抑制S18细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及体内转移能力，高转移细胞株S18敲除c-Src或鼻咽癌低转移细胞株S26过表达c-Src后细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及体内转移能力分别得到抑制或增强，提示c-Src通过活化状态phospho-Src(Tyr419)促进鼻咽癌的转移。3）Western-blotting结果显示phospho-Src(Tyr419)通过活化PI3K/AKT信号转导通路下游信号分子介导鼻咽癌细胞上皮-间质表型转化，从而增强鼻咽癌的转移侵蚀能力。免疫组化结果显示鼻咽癌原发灶中的p-Src与上皮标志物E-cadherin负相关。该研究揭示了p-Src在鼻咽癌转移中的重要作用并阐明了相关分子机制，为鼻咽癌的靶向治疗提供了新的靶点及科学依据。