两类多DNA病毒对寄主免疫细胞差异作用的机理研究

以携带不同类型PDV的两种内寄生蜂（菜蛾盘绒茧蜂和半闭弯尾姬蜂）寄生同一寄主（小菜蛾）的体系为研究切入点，系统比较菜蛾盘绒茧蜂多DNA病毒（CvBV）和半闭弯尾姬蜂多DNA病毒（DsIV）在竞争条件下对寄主小菜蛾体内免疫细胞的侵染和转录的差异，并比较同一个PDV（CvBV或DsIV）在适应和非适应寄主体内免疫细胞上转录、表达和胞外存活的差异，寻找与寄生蜂成功寄生和抑制寄主免疫细胞功能密切相关的PDV基因并明确这些基因的实际生物功能，争取在揭示PDV作用方式的某些机制方面取得一定的突破。本项研究不仅可为最终揭示寄生蜂利用PDV调控寄主的分子机理提供基础资料，深化对天敌昆虫如何成功控制寄主和种间竞争取胜的理解，而且可为获得具有提高寄生蜂控制能力和种间竞争能力的特定基因和相关生物分子提供了前所未有的机遇，为其他寄生蜂控害作用和寄主范围的研究提供借鉴经验。

本项目首先补充、完善了两种不同类型PDV（菜蛾盘绒茧蜂PDV（CvBV）和半闭弯尾姬蜂PDV（DsIV））的全基因组数据，最终两者基因组分别由35和47个闭合双链DNA环组成，预测分别编码157个和109个ORF。由此通过定量PCR的方法检测了CvBV和DsIV不同基因组片段在适应性和非适应性寄主血细胞内的侵染程度，发现CvBV或DsIV对同一寄主血细胞、基因组内不同片段之间的侵染程度都具有显著差异，其中CvBV侵染程度最高和最低的分别是片段C12和C34，而DsIV侵染程度最高和最低的分别是片段C28和C13；但是CvBV或DsIV基因组内同一片段对于来源于适应性寄主或非适应性寄主血细胞的侵染程度却相类似，表现为对非适应性寄主的侵染程度略低于适应性寄主的。通过对构建、筛选和分析CvBV或DsIV在不同适应程度寄主血细胞内的表达文库，发现CvBV在适应性和非适应性寄主血细胞内基因的表达差异表现在2个Ankyrin、7个PTP、2个EP和7新基因上，而DsIV表现在1个Ankyrin、8个Repeat Element、4个Cyst-rich、5个Innexin和2个新基因上。由此，通过获得基因序列全长，以及原核表达、制备抗体、基因定位、RNAi干扰等功能性研究，解析了部分功能，揭示了两类PDV抑制寄主血细胞免疫作用的作用途径，初步明确不同类型PDV调控寄主免疫的机制。