GOT/SO2在肢体缺血再灌注肺损伤中的作用及其机制研究

肢体IR所致急性肺损伤（ALI）是临床常见的并以肺泡-毛细血管膜通透性增加为特征的肺部炎症综合征，已知PMN在肺内大量扣押、过度激活和清除延迟是此种肺损伤发生的中心环节。我们前期的研究发现，新型气体信号分子SO2在肢体IR所致ALI发生中具有重要作用，有研究报道SO2可调控PMN凋亡。与ALI发病有关的各种细胞的激活和基因调控中，MAPKs都起到了重要的作用。据此我们提出下面的设想：SO2可通过ERK1/2 MAPKs通路影响黏附分子的表达从而影响PMN在肺内的聚集和活化；另一方面影响肺内PMN的凋亡，从而在肢体IR致ALI的发展和转归中发挥至关重要的作用。本课题拟应用高效、特异的RNA干扰（RNAi）技术，从PMN和肺微血管内皮细胞（PMVEC）黏附，PMN凋亡等方面，在整体和细胞水平探讨SO2在肢体IR所致ALI发生中的作用，并进一步探讨在此过程中是否有PI3-K→ERK1/2的参与。

背景和目的：研究发现，新型气体信号分子二氧化硫（SO2）在肢体缺血再灌注(IR)所致急性肺损伤（ALI）发生中可能具有调控作用,在此基础上本研究进一步观察GOT/SO2抗此种损伤的作用及机制。主要内容：建立动物和细胞SO2给与方法，复制大鼠肢体IR致ALI模型，整体和细胞水平观察内源性和外源性小剂量SO2对大鼠肢体IR所致ALI、肺内中性粒细胞（PMN）扣押及其血清所致的肺血管内皮细胞（PVEC）和PMN粘附、粘附分子表达、凋亡以及信号分子磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)和NF-κB活性等影响，应用MAPKs和PI3-K活性阻断剂干预以观察SO2作用的分子机制。主要结果：大鼠肢体IR所致ALI时肺内GOT/SO2水平降低，内源性和外源性小剂量SO2具有抑制大鼠肢体IR所致肺损伤的作用，作用机制与其抗炎症、抗氧化及抑制PMN肺内聚集与粘附有关。在离体情况下，小剂量S02具有抑制LPS和肢体IR患者血清所致的PMVEC损伤和凋亡、抑制PMN的激活和凋亡延迟、下调粘附分子表达并减轻PMN和PVEC粘附增强的作用；S02发挥作用的信号转导机制与其对PI3-K、p38MAPK及NF-κB信号分子和凋亡相关因子的调控有关。意义：初步阐明了新型气体信号分子-S02 抗肢体IR所致ALI损伤的作用和机制，丰富了气体信号分子的理论并为其最终临床应用奠定基础。