PSMA介导的miR-15a-miR-16-1靶向纳米载药系统的构建及其抗前列腺癌的作用研究

前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤，microRNA有望成为最有前途的治疗药物，因此迫切需要研究新型非病毒靶向性载体。本课题以PAMAM纳米粒为载体，miR-15-a和miR-16-1为模型药物，A10适体为靶向头基，PSMA为作用靶点，共同构建PSMA介导的靶向纳米复合物，并对其抗前列腺癌作用及安全性进行研究。将PAMAM纳米粒表面接上能够与PSMA特异性结合的A1O性适体，通过适体导向作用靶向于前列腺癌细胞，从而改变基因药物在体内肿瘤/ 非瘤组织中的分配，进一步提高疗效和降低副作用；采用PAMAM包裹miR-15a与miR-16-1同时作用于前列腺癌细胞的多靶点，具有比单个miRNA治疗更好的效果。本项目研究为前列腺癌特别是激素非依赖性前列腺癌的治疗开辟了一条新途径，为肿瘤生物治疗药物的靶向递药系统设计提供了理论依据和方法借鉴，也为其它肿瘤的靶向治疗提供了新的研究方法和思路。

背景：前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤，基因治疗已成为最有前途的治疗方法，因此迫切需要一种安全、高效的传递载体进行基因递送。.主要内容：本课题以聚酰胺-胺（PAMAM）纳米粒为药物载体，miR-15a和miR-16-1为模型药物，A10-3.2适体为靶向头基，前列腺特异性膜抗原（Prostate specific membrane antigen，PSMA）为作用靶点，共同构建PSMA介导的靶向纳米复合物（A10-PEG-PAMAM/miRNAs），并进一步对其抗前列腺癌作用的机理进行研究。.重要结果：（1）合成PMAM-PEG-YPSMA高分子材料，包裹报告基因DNA，制备PMAM-PEG-YPSMA/DNA纳米粒，其粒径约为190nm，zeta电位约为18mV，具有良好的稳定性，并显著提高了报告基因DNA对高表达PSMA的前列腺癌细胞LNCaP细胞的转染效率，但是单克隆抗体作为靶头具有价格昂贵、稳定性差且有一定的免疫源性，因此以单克隆抗体作为靶头的主动靶向给药系统难以有更多发展空间；（2）合成PAMAM-PEG-A10高分子材料，包裹报告基因DNA，制备PAMAM-PEG-A10/DNA纳米粒，其粒径约为180nm，zeta电位约为18mV，电镜显示呈球形、表面圆整光滑，稳定性较好，并显著提高了报告基因DNA对高表达PSMA的前列腺癌细胞LNCaP细胞的转染效率。与单克隆抗体相比，适体具有分子量小、价格低廉以及没有明显的免疫原性等优势，因此以适体A10-3.2作为靶向头基的纳米主动靶向给药系统在前列腺癌的治疗中具有更广阔的发展前景；（3）利用PAMAM-PEG-A10高分子材料包裹可以抑制雄激素依赖型前列腺癌细胞LNCaP生长的miRNA-15a和miRNA-16-1，构建新型纳米主动靶向给药系统PAMAM-PEG-A10/miRNA，具有良好的靶向性以及抗前列腺癌增殖效果，与另外3个对照组之间均有显著性差异。通过对给药组的血常规及肝肾功能检测，PAMAM-PEG-A10/miRNA组与对照组之间没有显著性差异，即其没有明显的肝肾毒性和骨髓抑制，是较化疗药物更加安全的新型基因治疗药物。.科学意义：本课题研究为前列腺癌的治疗开辟了一条新途径，为生物治疗药物的递药系统设计提供了理论依据和方法借鉴，也为其它肿瘤的基因治疗和靶向治疗提供相关的研究方法和思路。