青翘与老翘功效差异及关联物质基础的研究

Forsythiae fructus is the dryfruit of Oleaceae plant Forsythia Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl and is a an important component of effective prescription. According to the different collectted time, it was usually divided into. literature reviews and previous researches have revealed that 'Qingqiao' and 'Laoqiao'was not divided by the collectted time， also showed some differences in some components and pharmacodynamics. Therefore, the hypothesis we proposed is that there must be some clinical efficacy difference between Qingqiao and Laoqiao.First, we study the difference of antibacterial, antiviral, anti endotoxin, anti-inflammatory and hepatoprotective effect between the two and, which is verified with the classic recipe. Second, we use GC-MS/HPLC-MS technique to build the corresponding chemical fingerprint according to the active sit , then the dates of chemical information and biological information were analyzed through gray correlation, multiple regression analysis and so on. Finally we can Clarify the relationship of spectrum-effect, seek the key constituents, establish standardization quality control method of Qingqiao and Laoqiao.Through this project, we will provide scientific basis for the reasonable application of Forsythia suspensa resource, and standardize the clinical indications of usage and dosage of Qingqiao and Laoqiao repectively.

连翘为木犀科植物连翘 Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果实，为临床常用方剂的重要组成药味，按采收时间不同，分为青翘与老翘。文献及前期研究表明青翘与老翘除采收时间的不同，在某些成分及药效作用方面也有一定差异。由此，本项目提出两者存在临床功效差异的假说。研究拟首先以单味青翘与老翘水提取物从抗炎、抗内毒素、发汗、保肝等指标探究两者的药效差异，并以经典代表方剂进行验证；其次，以差异药效指标筛选青翘与老翘对应的活性物质部位，采用GC-MS/HPLC-MS等技术建立相应化学特征图谱，基于谱效学，通过灰色关联度、多元回归分析等方法将化学信息和生物信息进行数据拟合，明确谱效关联性，寻找关键药效组分，进而建立青翘和老翘专属的质控指标。本项目研究旨在解决青翘、老翘长期"有名无实"的现象，为连翘资源的合理应用提供科学依据，为进一步规范临床功能主治、用法用量奠定基础。

连翘为常用中药材，以采收时间不同习分为“青翘”与“老翘”，早在明代即有记载，历版中国药典亦有相应收载，但其功效是否差异及差异物质为何，迄今未见有系统的研究报道。本项目对青、老翘的药效学进行了系统比较，并以经典方剂进行验证，结果表明抗炎、抗内毒素、发汗作用青翘优于老翘，保肝和利胆作用两者无明显差异，但降低ALT活性老翘优于青翘；经方银翘散（青翘）组抗急性肺损伤炎症作用优于银翘散（老翘）组，在疮疡模型实验中，老翘单独使用时促进创面愈合作用不如青翘，但在复方连翘散中，其作用优于以青翘入药，体现了中药复方配伍的优势。可见，青、老翘功效确有一定差异，分而用之具有科学性，也有必要性。.进一步通过溶剂萃取得到青、老翘的不同极性部位。以急性肺损伤炎症模型明确乙酸乙酯部位为青翘抗炎活性部位，该部位能够抑制IL-6、TNF-α、IL-1β等炎症因子的释放，代谢组学结果表明主要通过调节肌酸代谢、胆碱代谢等通路发挥其抗炎作用；以CCl4致大鼠急性肝损伤模型明确老翘水煎液能显著降低大鼠血清中ALT和AST的活性，可明显改善水样变、脂肪变及坏死后炎性细胞浸润等病理变化，保肝活性最佳。.采用HPLC法建立药材及各部位的指纹图谱，将“谱”的共有峰分别与抗炎、保肝的“效”指标进行关联。以灰色、双变量相关分析，连翘苷、槲皮素、连翘脂素、松脂素、表松脂素和异鼠李素为青翘抗炎的活性成分；以偏最小二乘回归分析，连翘苷、槲皮素、连翘脂素、松脂素-β-D-葡萄糖苷为老翘保肝的活性成分。其中连翘苷、槲皮素、连翘脂素既有明显的抗炎作用，又可发挥保肝作用，充分体现了中药多成分、多靶点的协同作用特点，其他未知成分有待进一步确认。上述与“效”密切关联成分的确认为青翘和老翘的专属质量评价指标的确定奠定了良好基础。.本项目研究为解决青翘、老翘长期“有名无实”的现象提供了一定科学依据，也为进一步规范连翘“一体两用”的临床功能主治、用法用量奠定了基础。