miR-216a-PTEN信号通路在重症急性胰腺炎并发肾损伤中的机制研究

重症急性胰腺炎（SAP）并发急性肾功能不全是导致患者病情恶化的常见原因，如何实现早期预警并针对其中的关键环节进行干预是临床诊治中的焦点问题。本研究在前期发现SAP动物模型中血清miR-216a呈现特异性的高表达，并且有研究提示miR-216a可通过下调磷酸酶-张力蛋白同源物（PTEN）而激活Akt通路，引起肾小球细胞损伤。因此拟开展下述研究：1）研究SAP合并肾损伤动物模型中，miR-216a/miR-217及其上游调控分子miR-192和TGF-β的表达情况，并通过miR类似物或抑制剂观察其对下游PTEN和Akt通路的影响；2）比较miR-192、216a和217对SAP大鼠合并肾损伤的预警价值；3）在临床标本中开展相关miRNAs的验证研究。通过上述研究，力图阐明miR-216a在SAP合并肾损伤中的作用机制和靶点，为其抑制剂作为潜在的SAP早期干预药物奠定理论基础。

急性胰腺炎是内科常见急症，且发病率逐年增高。尽管多数患者病程呈自限性，临床上仍有20％～30％患者进展为重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis, SAP），临床经过凶险，死亡率达30%。对SAP早期诊断并及早干预是提高患者生存率，改善预后的关键。本课题以循环血miRNA为研究对象，探究其作为SAP研究标志物的潜在价值。在动物实验研究中，以SD大鼠精氨酸胰腺炎模型为研究对象，检测血浆中miR-216a的表达水平，结果显示miR-216a在胰腺炎组血浆中显著上调，提示其作为胰腺炎诊断标志物的潜在价值。进一步，通过收集临床样本进行SAP循环血miRNA标志物筛查。通过芯片分析研究发现：SAP患者血清中80种miRNA表达量显著上调。利用实时定量PCR对其中部分miRNA进行定量检测，发现9种miRNA（miR-216a, 217, 6083, 4294, 3187, 631, 1208, 3127, 3180-3p）在SAP血清中显著高表达，提示其可作为SAP早期诊断的标志物。进一步的临床相关性研究发现：miR-216a与急性胰腺炎严重程度密切相关，ROC分析提示其具有很好的诊断价值。后续研究提示胰腺细胞破坏可能是miRNA入血，并作为潜在标志物的可能机制。该部分研究提示循环血miRNA可作为SAP早期诊断的标志物，为进一步临床应用奠定了基础。.急性肾损伤是SAP的重要并发症。本课题初步探讨了胰腺炎介导肾损伤的潜在机制及靶向干预研究。通过收集伴有（或不伴有）肾损伤的急性胰腺炎患者血清，发现伴有肾损伤组中miR-216a/217的表达量显著上调，且肾脏组织中的miR-216a/217的表达量亦显著上调。在大鼠肾小管导管上皮细胞中，上调miR-216a可抑制PTEN，激活pAKT、mTOR，提示miR-216a/PTEN通路参与了急性胰腺炎诱导的肾损伤过程，上述机制尚在进一步研究中。.炎症是肿瘤发生的重要驱动因子。本课题在前期研究基础上，对胰腺“炎-癌”转化的关键通路进行研究，发现miR-494对FoxM1蛋白存在直接的靶向抑制作用。Smad4基因突变介导了miR-494/FoxM1通路的失活。鉴于TGF-β/Smads通路在胰腺癌炎癌转化中的重要作用，该课题研究为胰腺癌发病提出了新的机制解释。为进一步的胰腺癌诊断及干预研究提供了新的潜在靶点。