基质金属蛋白酶2在肝泡状棘球蚴侵袭、转移性生长中的作用

肝泡状棘球蚴病是对人体危害极大的人畜共患寄生虫病，原发于肝脏，呈恶性浸润性生长，可继发肺、脑等远处转移，手术及药物治疗效果差，其浸润性生长和转移的机制尚不明确。基质金属蛋白酶2（MMP-2）在多种恶性肿瘤浸润性转移性生长中发挥重要作用，抑制MMP-2的合成和蛋白活性能显著遏制肿瘤的浸润性生长和转移。前期研究发现，MMP-2在鼠肝泡状棘球蚴和转移病灶中均强阳性表达，我们推断MMP-2在肝泡状棘球蚴的浸润性生长和转移的过程中发挥重要作用。本研究拟通过体外培养泡状棘球蚴和建立小鼠肝泡状棘球蚴模型，检测泡状棘球蚴在体外培养和体内浸润性生长过程中MMP-2的表达；在体内体外，应用靶向siRNA质粒转染技术和MMP-2特异性抑制剂，干扰MMP-2的合成和降低其蛋白活性，观察泡状棘球蚴生长发育情况，探讨MMP-2在小鼠肝泡状棘球蚴浸润性生长和转移过程中的作用，为该病的药物治疗提供新的靶点及实验依据。

肝泡状棘球蚴病（Hepatic alveolar echinococcosis，HAE）是对人体危害极大的人畜共患寄生虫病，原发于肝脏，呈恶性浸润性生长，可继发肺、脑等远处转移，其浸润性生长和转移的机制尚不明确。基质金属蛋白酶2（MMP-2）在多种恶性肿瘤浸润性转移性生长中发挥重要作用，抑制MMP-2的合成和蛋白活性能显著遏制肿瘤的浸润性生长和转移。本研究通过体外培养泡状棘球蚴和建立小鼠肝泡状棘球蚴模型，检测泡状棘球蚴在体外培养和体内浸润性生长过程中MMP-2的表达；在体内体外，应用靶向siRNA质粒转染技术和MMP-2特异性抑制剂(SC-204092)，干扰MMP-2的合成和降低其蛋白活性，观察泡状棘球蚴生长发育情况。.体外实验结果显示：应用MMP2抑制剂和MMP-2 siRNA干预体外培养的泡状棘球蚴头节，MMP-2抑制剂和MMP-2 siRNA干预组头节的死亡率和凋亡率均明显高于模型对照组（P＜0.05），而且具有浓度依赖性和时间依赖性（P＜0.05）；MMP-2 siRNA对人骨髓间充质干细胞增殖活性无明显影响。.肝泡状棘球蚴小鼠体内实验结果显示：小鼠肝泡球蚴浸润性生长过程中，血清和虫体周围肝组织中MMP2、VEGF及其mRNA的表达均明显增高，泡球蚴周围组织的肝细胞及炎细胞的凋亡指数明显增高。分别用MMP-2抑制剂和MMP-2 siRNA转染干预，高浓度抑制剂组和MMP-2 siRNA转染组肝泡球蚴组织的浸润性生长较模型对照组缓慢：高浓度抑制剂组和MMP-2 siRNA转染组的肝泡球蚴组织的囊湿重明显降低于模型对照组（P＜0.05），减蚴率明显高于模型对照组（P＜0.05），泡球蚴周围组织中肝细胞、炎细胞的凋亡指数明显低于其他对照组（P＜0.05）。高浓度抑制剂组和MMP-2 siRNA转染组的小鼠血清中和泡球蚴周围肝组织中MMP2、VEGF的表达较其他组均明显降低（P＜0.05），而TIMP-2表达量均无差异（P＞0.05）。.根据实验结果得出结论：泡状棘球蚴在宿主肝内生长发育过程中，促进其周围组织细胞分泌MMP-2，利用MMP-2 siRNA和特异性抑制剂均可抑制宿主体内MMP-2的表达，从而遏制肝泡状棘球蚴的浸润性生长发育。因此，MMP-2在泡状棘球蚴宿主肝内浸润性生长过程中起到重要作用，MMP-2可能是靶向治疗肝泡状棘球蚴病的新靶点。