热休克蛋白与肿瘤发生、发展相关性研究-基于鸡马立克氏病

热休克蛋白（HSP）与肿瘤发生、发展及转归有着密切关系。由于HSP表达量、细胞内定位等指标动态变化与肿瘤的发生、发展之间的相关性研究不够全面，限制了HSP在肿瘤的提前诊断、预防和治疗中的应用。鸡马立克氏病与人类的多种癌症的发生机制相似，因此引起了肿瘤学者的很大兴趣。本项目拟以鸡马立克氏病为模型，利用荧光定量RT-PCR、免疫组织化学、ELISA等技术，动态研究HSP的转录、表达水平以及血清内HSP抗体滴度与P53、P16、ras等肿瘤相关基因的表达、肿瘤发生发展等之间的相关性，HSP组织细胞定位与肿瘤细胞分化程度、细胞凋亡之间的相关性，揭示HSP在肿瘤发生、发展过程中的生物学作用，寻找抗肿瘤的新HSP靶点，探索肿瘤的提前诊断指标，为进一步研究HSP干扰肿瘤细胞凋亡的信号转导机制、寻找新的抗肿瘤药物奠定理论基础，同时，本项目的实施有望进一步充实肿瘤病理形态形成的分子机制。

热休克蛋白（Hsp）与肿瘤发生、发展及转归有着密切关系。由于Hsp表达量、细胞内定位等动态变化与肿瘤的发生、发展之间的相关性研究不够全面，限制了Hsp在肿瘤的提前诊断、预防和治疗中的应用。本项目以鸡马立克氏病为模型，利用组织学、免疫组织化学、荧光定量RT-PCR、ELISA等技术，动态研究Hsps组织细胞内定位、Hsps的转录和表达水平、血清内Hsp抗体滴度与肿瘤发生、发展等之间的相关性，揭示Hsps在肿瘤发生、发展过程中的生物学作用，寻找抗肿瘤的新Hsps靶点，探索肿瘤的提前诊断指标，为进一步研究Hsps干扰肿瘤细胞凋亡的信号转导机制、寻找新的抗肿瘤药物奠定理论基础。本项目研究发现MDV攻毒组试验鸡在14日龄，肝脏、肾脏、腺胃等组织肿胀，多形态淋巴细胞聚集；21日龄，肝脏、肾脏等个别组织有肉眼可见的肿瘤病灶，肿瘤细胞在组织内浸润性生长；28日龄后，基本所有攻毒组采样组织可见肿瘤病灶，组织正常结构由于受压迫而萎缩。Hsp60和Hsp90在肿瘤细胞胞浆内强表达，组织内定位与肿瘤病灶具有明显相关性；Hsp27和Hsp70主要在肿瘤病灶外的组织细胞有阳性染色。在14-70日龄，攻毒组血清内Hsp90的抗体极显著升高；在28-70日龄，攻毒组血清内Hsp60的抗体极显著升高；整个试验周期中，攻毒组血清内Hsp27的抗体与对照组相比，差异不显著；在21日龄，攻毒组血清内Hsp70的抗体极显著升高。在整个试验周期中，空白对照组和疫苗对照组试验鸡组织脏器中Hsps表达量多为差异不显著，而攻毒组鸡组织脏器中Hsps表达水平有不同程度的升高，且各肿瘤组织中Hsp60和Hsp90的表达水平持续显著升高。组织中Hsp60和Hsp70 mRNA的转录水平随病程发展皆呈现出不同程度的升高，且具有在21或28日龄时到达高峰，后期逐渐降低，趋于稳定的趋势，且Hsp60和Hsp70 mRNA转录水平增高多在1-2倍之间，远低于Hsp60和Hsp70蛋白质升高的幅度，证明肿瘤发生可以导致Hsp60和Hsp70转录水平的提高，且Hsp的表达升高除了转录水平升高外，还有其他途径调节Hsp的表达水平。整个试验周期，疫苗对照组和空白对照组ND和AI H9抗体水平差异不显著，而MDV强毒攻毒组，在21-42日龄，ND和AI H9抗体水平显著或极显著低于对照组，说明MDV强度对机体免疫力具有明显抑制作用