自噬对化疗诱导肿瘤细胞上皮-间质转化现象的调节作用

Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is tightly related with mutiple malignant behavors of cancer cells. Our previous study showed that the autophagy and EMT induced by chemotherapy are mutual repulsion and induction of autophagy could inhibit the EMT by reduction of the production of reactive oxygen species (ROS). Based our study that autophagy could regulate EMT this project suggested regulation of EMT by autophagy induction and therfore improved the conventional chemotherapy. Firstly, confirming tha fact that it is popular that autophagy and EMT induced by chemotherapy are mutual repulsion.then, establishing a cellular model on which autophagy could regulated EMT. Based this model the feasibility of autophagy inducers combined with chemotherapy was assayed by evaluating the effecancy of antitumor, the survival,the potential of metastasis and the formation of cancer stem cell. Furthermore, the molecular mechanisms of autophagy inhibiting EMT would be assayed. Firstly, screening out the ROS-dependent and ROS-nondepedent the cross talk bewteen autopgay and EMT. Secondly, screening out the regulatory microRNA during the process of autophagy regulating EMT. These study would give out evidence for control of EMT.

上皮-间质转化（EMT）现象与肿瘤细胞的多种恶性行为密切相关。我们的前期研究发现：化疗药物诱导的EMT现象与自噬现象是相互排斥的；人为诱导自噬能抑制化疗诱导的EMT，其机制与自噬减少化疗诱导的活性氧簇（ROS）聚集有关。基于自噬和EMT相互调节的现象，本课题提出通过诱导自噬或活化自噬相关信号来抑制EMT进而改进化疗的构想。拟在确认化疗过程中EMT和自噬相互排斥的现象具有普遍性的基础上，建立自噬调节EMT的细胞模型。在此模型上从抑瘤效率、荷瘤鼠生存时间、转移潜能和肿瘤干细胞形成等方面评价使用自噬诱导剂改善化疗的可行性。同时，在此模型上分析自噬调节EMT的分子机制，包括：1. 寻找ROS依赖的和ROS非依赖的自噬信号与EMT信号的交汇点。2. 筛选在自噬调节EMT过程中发挥关键调控作用的microRNA。上述研究将为在应激条件下调节残留肿瘤细的EMT现象提供基础。

通过一系列的临床研究，我们首次发现ENKL-MDSCs (主要是 Mo-MDSCs)具有抑制T细胞增殖的功能并可作为病人的预后指标；我们的研究表明对于不能使用免疫检查点抑制剂的中国黑色素瘤患者，白蛋白结合型紫杉醇与卡铂的联合应用方案是一个较好的选择；我们的研究证实免疫检查点抑制剂用于转移性黑色素瘤和已有HBV感染的转移性黑色素瘤治疗是有效和安全的。.在基础研究方面，我们的结果表明抑制腺病毒感染不依赖顺铂耐药性肺腺癌细胞上柯萨奇病毒和腺病毒受体的表达。我们的研究表明ROS-Akt-Snail信号通路是介导化疗药物奥沙利铂引起的EMT和肿瘤迁徙转移的重要机制。此外，近期研究表明细胞表面的CRT可以促进化疗诱导的免疫性细胞死亡。我们的结果显示：细胞自噬的激活和内质网应激都是化疗药物Oxaliplatin诱导CRT向细胞表面转位的必要而非充分条件。能激活自噬而不能引起细胞内质网应激的药物不能促进细胞表面CTR增加，同时使用自噬激活剂和内质网应激诱导剂可以非常有效地促使CRT向细胞表面转位。进一步，我们证明Oxaliplatin引起内质网应激激活PERK/eIF2α来抑制mTOR/ULK1活性，从而激活Beclin 1依赖的自噬通路并且引起细胞表面CRT的增加。我们发现在早期阶段抑制自噬可以阻断CRT向细胞表面转位，而在末期阶段抑制自噬可以明显增加CRT的细胞表面转位。总之，我们的结果说明可以通过使用内质网应激诱导剂使5-Fu和SN-38等可以激活自噬的药物获得引起细胞免疫性死亡的能力，并同时使用自噬末期抑制剂来进一步增强他们的诱导ICD能力。