Pals1在建立胃壁细胞极性过程中的功能研究

胃壁细胞在极化过程中由于参与极性形成的复合物中不同蛋白质的相互作用而形成了顶膜与底膜功能域。Pals1在维系上皮细胞极性的紧密连接中起着不可或缺的作用。我的最新工作揭示了Pals1与ezrin的相互作用并阐明Pals1对ezrin在顶膜定位的重要性。我拟以胃壁细胞为模式系统，利用pull down与酵母双杂交技术，同时结合功能蛋白质组学，分离和鉴定与Pals1相互作用的蛋白质，进而进行基因克隆、蛋白表达以及抗体制备。我将利用siRNA，免疫荧光，免疫共沉淀以及活细胞实时观察等技术评估Pals1及其结合蛋白在胃壁细胞极性建立与维持过程中的功能。同时，我还计划通过缺失突变及pull down等技术，确定Pals1与ezrin发生相互作用的domain，并对其进行功能评定。我相信该项研究的开展将为阐明Pals1在建立与维持细胞极性过程中的分子机制及进一步描绘胃壁细胞胞吐过程的生化通路奠定基础。