基于Nrf2/HO-1通路探讨藏药诃子药效物质“补隆”促脑缺血后血管新生的作用

Ischemic stroke is a major disease which has seriously threatened human health. At present, there are no ideal clinical treatments or measures. Therapeutic angiogenesis is core strategy for recovery after stroke, which is beneficial to illuminate "Benefiting rLung and nourishing blood" theory in Tibetan medicine. Our previous studies had demonstrated that terminalia chebula retz (TC) could significantly ameliorate infarct volume, improve neural function and increase brain microvessel density and endothelial progenitor cells (ECPs) in cerebral infraction rats, which suggested that polyphenols, the effective substances from TC, could improve angiogenesis to ameliorate cerebral ischemia injury. Nrf2/HO-1, main target of polyphenols, is a new regulation pathway in vascular endothelial growth factor (VEGF)-induced angiogenesis. Our preliminary experiment indicated that active ingredients of TC could increase expression of Nrf2 in cerebral tissue after cerebral infarction. Whether the material base of TC could improve angiogenesis to protect cerebral ischemia injury through regulation of Nrf2/HO-1 is needed further studies. This study planned to screen phenolic compounds of TC by activity tests in vitro, and study the cerebral protection of effective components in TC through promoting angiogenesis on the animal, cellular and molecular levels. Our study will provided a new strategy for treatment of stroke.

缺血性脑卒中是严重危害人类健康的重大疾病，目前临床尚无理想的治疗药物或措施。治疗性血管新生是脑缺血损伤后恢复的核心策略，这与藏医“补隆养血”的理论相得益彰。“藏药之王”诃子具有调“隆”功效，已发现其在心脑血管疾病中潜在的药用价值。我们前期研究证实，诃子可显著降低脑缺血大鼠的脑梗死体积，促进神经功能恢复，增加脑微血管密度及外周血内皮祖细胞含量，提示诃子药效物质多酚类成分可能促进血管新生、改善脑缺血损伤。我们的预实验也证实，诃子多酚成分能够显著增加体外OGD模型中细胞Nrf2的表达。有研究表明，多酚成分的靶通路Nrf2/HO-1可能是介导新生血管形成的调控机制之一。诃子药效物质是否通过调控Nrf2/HO-1促进血管新生发挥抗脑缺血损伤作用有待验证。本课题拟对诃子多酚成分进行体外活性筛选，而后在整体、细胞、分子水平阐述其促血管新生的脑保护作用及机制，为脑卒中提供创新性的药物治疗思路。

缺血性脑卒中是严重危害人类健康的重大疾病，目前临床尚无理想的治疗药物或措施。治疗性血管新生是脑缺血损伤后恢复的核心策略。有研究表明，诃子在心脑血管疾病中具有潜在的药用价值，其主要成分为多酚类物质。我们前期研究证实，诃子可显著降低脑缺血大鼠的脑梗死体积，促进神经功能恢复，增加脑微血管密度及外周血内皮祖细胞含量。多酚成分的靶通路Nrf2/HO-1可能是介导新生血管形成的调控机制之一。本课题拟对诃子多酚成分进行体外活性筛选，在整体、细胞、分子水平阐述其促血管新生的脑保护作用及机制，为脑卒中提供创新性的药物治疗思路。.课题具体研究内容与结果如下：1.证明诃子药效物质：诃子酸、诃黎勒酸和柯里拉京均具有促进OGD模型下的BMECs细胞增值，降低凋亡。柯里拉京及诃子酸均对MCAO大鼠具有脑保护作用，可改善大鼠神经功能学评分，减少大鼠梗死面积，改善大鼠病理学损伤，增加大鼠脑微血管密度。2. 借助代谢组学研究策略，对诃子提取的脑保护作用进行网络靶点机制的挖掘解析，明确了诃子在氧化应激、能力代谢途径中的调控作用；考察诃子药效物质柯里拉京在体内体外模型中的作用并对机制进行探讨；通过体内外的基因干扰技术，验证了Nrf2激活及其下游蛋白HO-1、VEGF/VEGFR2的在柯里拉京脑保护中的关键调控作用。3.通过网络药理学技术，对诃子及组方三果汤进行了组分-靶点的关系分析，明确了其心脑血管保护多靶点机制，为下一步研究的扩展应用提供了数据参考。.总之，本课题以民族药诃子为工具药，首次对诃子抗脑卒中效果进行药效学评估，阐明诃子药效物质可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路，调节脑缺血再灌注后血管新生和抗氧化损伤。本研究不仅使我们对民族药诃子及其活性成分有了全新的认识，也揭示了诃子抗脑缺血损伤的作用机制，为临床诃子有效治疗缺血性脑卒中提供指导。