脾脏微环境对于非照射急性T淋巴细胞白血病的影响

Leukemia is a clinical and biological malignant disease, although the remarkable strides utilized in treatment and the extraordinary advances performed in molecular and cellular biology techniques, but the molecular basis still is a mystery. For mice, in addition to the BM's cavity, spleen confirmed another important place for hematopoietic stem cells and leukemia cells to search for. We found the spleen plays an important role in T-ALL mice.We utilized a T-ALL mouse model for the study of the leukemia. Flow cytometry and splenectomy were used to analyze distribution of leukemia cells and the function of the spleen on the survival.This study is helpful to determine the probable key molecules and its mechanism in the initial stage after T-ALL cells transplantation. Intervention or drug could be carried out for molecular targeting base on the theoretical basis. The clinical control of T-ALL provides a new way for treatment or disposal.

白血病是一种恶性程度极高的造血系统恶性疾病，但是其发病机制仍不确定，而且关于白血病细胞在体内的分布定位也罕有报道。造血干细胞在移植后很快就能够归巢进入骨髓腔，白血病细胞是不是也有同样的生物学特性，还是机体有其他更特异的微环境吸引恶性细胞归巢进入其他脏器？众所周知，脾脏在造血系统中也起重要的作用。在白血病发病末期，脾脏中驻留大量的白血病细胞，表明脾脏在白血病的发展过程中会扮演重要角色。我们通过非照射小鼠白血病模型，并利用蛋白芯片、流式细胞术、摘除脾脏术等来研究脾脏对于急性T淋巴（T-ALL）白血病发展的作用及影响，这一研究有助于确定T-ALL白血病细胞在移植后体内早期发展过程中的关键分子机制，并可以为下一步进行分子水平的干预或药物的靶向研究提供理论基础，为临床控制T-ALL白血病提供一种新的治疗或处置途径

首先我们构建了非照射T-ALL小鼠模型，然后利用流式细胞术检测了T-ALL 细胞在移植后小鼠机体内的分布与增殖情况。发现脾脏内的白血病细胞数迅速增加。为了证实脾脏对于小鼠T-ALL有促进作用，我们进行了摘脾实验。实验结果显示对于T-ALL白血病,脾脏的摘除能够显著性的延长发病小鼠的生存时间，但摘除脾脏对于MLL-AF9白血病小鼠并没有相同的作用。说明脾脏对于不同的白血病的作用是不同的，具有一定的特异性。利用双光子荧光显微镜进行观察，发现相对于骨髓脾脏内的白血病细胞迅速增多。收集骨髓与脾脏微环境中的组织液，利用蛋白芯片检测发现脾脏微环境中趋化因子MIP-3β的表达与骨髓微环境中的表达不同，基因芯片检测结果发现造血干细胞CCR7表达异常。收集脾脏、骨髓、外周血微环境中的外泌体，采用RNA测序检测了不同微环境内的外泌体中lncRNA表达差异，期望找出脾脏微环境的特异之处。结果没有筛查到脾脏、骨髓、外周血微环境中共同特异性表达的lncRNA；以骨髓为对照，没有筛查到脾脏与外周血共同特异性表达的lncRNA；但是以外周血为对照，筛查到脾脏与骨髓特异性低表达的LNC_001669、ENSMUST00000199958.1、LNC_000318、LNC_001742、LNC_000317、LNC_000554、LNC_001151、LNC_000257和高表达的LNC_000846、LNC_000643、LNC_001750、 LNC_000838、LNC_000845、LNC_000438、ENSMUST00000200021.1。此外，利用非照射T-ALL小鼠模型，分别给予槲皮素、阿霉素、槲皮素+增敏阿霉素检测不同治疗手段的化疗效果，并分析其原因是否与脾脏微环境的改变有关，结果发现槲皮素可能是通过降低高剂量阿霉素对于心肌的损伤，从而延长T-ALL小鼠的生存期。