华山松松塔中抗HIV活性成分的研究

内容：在体外活性追踪指导下，本项目拟从华山松松塔中抗HIV活性显著的有效部位为研究对象进行研究：①柱色谱法等技术对抗HIV活性最强的有效部位进行分离；②利用物理与化学方法及现代波谱技术进行有效成分结构鉴定；③测试其对HIV-1感染细胞的保护作用、对HIV-1致细胞病变的抑制作用、对HIV-1复制的抑制作用，以筛选出其对抗HIV活性显著的成分。.意义：我们对云南松的松塔进行研究同时，对其它松的松塔也展开初步研究，发现了华山松松塔中抗HIV活性最强的有效部位。在大理、丽江等州市，华山松松塔资源容易获取，每逢中秋时分，农民从华山松松塔中获取松子去集市交易时，大量的松塔被丢弃或作为燃料。对其深入研究，可研发成治疗艾滋病新药，同时还可变废为宝、为农民致富及云南的经济发展开拓一个新增长点。

我们对松科(Pinaceae)松属（Pinus）华山松(Pinus armandii Franch.) 的松塔进行研究，以期发掘松塔中抗艾滋病毒活性成分。通过三年时间，基本完成了预定研究目标，取得成果如下：①应用乙醇冷浸提取和碱溶酸醇沉法、色谱法（反相材料RP-18、中压色谱MPLC, MCI, HPLC等）现代提取分离技术, 并在体外活性（in vitro）追踪指导下，从华山松松塔中获得33个单体化合物，结合IR、MS、1D-NMR、2D-NMR等波谱分析方法鉴定了27个化学结构；②参照刘光明教授等工艺路线，从华山松松塔中获得13个提取部位，完成了对这13个提取部位的C8166细胞毒性实验、HIV-1IIIB致细胞病变(CPE)的抑制实验、HIV-1IIIB感染MT-4细胞死亡的保护实验。首次从华山松松塔中筛选出体外抗HIV活性显著的部位，它对HIV-1诱导C8166细胞形成合胞体抑制有很强的活性，其治疗指数最高的达到182.78(一般而言，治疗指数超过30便有进一步研究价值)；③发表了中文核心期刊论文4篇（尽管在研期间只有1篇，另三篇在此课题批准之前发表的，但现在审稿状态有3篇，即结题后仍有中文核心期刊论文发表）；④初步制定了华山松松塔原材料质量标准；⑤培养了硕士研究生2名。本项目为最终研发出有自主知识产权的抗HIV新药奠定了基础。