基于Zip Nucleic Acids引物对高度降解和低拷贝DNA检材的STR分型研究

自DNA 指纹图技术应用于法庭科学以来，DNA分析技术已成为当前法医物证鉴定最主要的技术手段，在刑事犯罪侦破和民事诉讼中发挥着重要的作用。然而对于法医学实践中经常面临的高度降解和低拷贝(Low Copy Number, LCN)DNA检材，如何从中获取可靠的、足量的遗传学信息，来进行法医学个体识别和亲权鉴定，一直是法医物证学面临的重大挑战。Zip Nucleic Acids (ZNA)是最新一代反义寡核苷酸衍生物，用ZNA修饰的引物具有与靶序列结合迅速、超强亲和力、Tm值显著提高并且易于精确调控及适合快速、多重PCR扩增等诸多优点。本研究计划在课题组以往研究基础上并充分利用已有的相关群体数据，使用ZNA修饰和miniSTR等方法，建立适合在中国人群中进行高度降解和LCN检材法医学STR分型的复合扩增分型体系，从而为解决法医学这一难题提供新的有价值的途径。

自DNA指纹图技术应用于法庭科学以来，DNA分析技术已成为当前法医物证鉴定最主要的技术手段，在刑事犯罪侦破和民事诉讼中发挥着重要的作用。然而对于法医学实践中经常面临的高度降解和低拷贝(Low Copy Number, LCN)DNA检材，如何从中获取可靠的、足量的遗传学信息，来进行法医学个体识别和亲权鉴定，一直是法医物证学面临的重大挑战。Zip Nucleic Acids(ZNA)是最新一代反义寡核苷酸衍生物，用ZNA修饰的引物具有与靶序列结合迅速、超强亲和力、Tm值显著提高并且易于精确调控及适合快速、多重PCR扩增等诸多优点。本研究使用东北、西北、西南、中南和华东汉族人群以及藏族、蒙古族、土家族、撒拉族、哈萨克、白族、维族、俄罗斯族等少数民族群体样本进行群体遗传学研究，筛选出CODIS系统的D13S317、 D7S820、D2S1338、D16S539、D18S51、CSF1PO、FGA等7个基因座外，以及D19S253、D10S1248、D14S1434、D22S1045、D4S2364、D2S441、D1S1677、D3S3053、D6S474、D20S482、D1GATA113、D2S1776、D4S2408、D1S1627、D5S2500、D3S4529、D6S1017、D9S2157、D9S1122、D10S1435、D12ATA63、D17S1301、D18S853、D20S1082、D11S4463、D19S433等26个非CODIS系统基因座。在此基础上，使用ZNA修饰和miniSTR等方法，建立了分别包括8个CODIS系统基因组及两组各8个非CODIS系统基因座等三组miniSTR复合扩增荧光分型体系。通过对所建立的miniSTR复合扩增分型体系进行种属、组织同一性、灵敏度及降解样本的检出率等法庭科学有效性验证，表明该复合扩增分型体系适合在中国人群中进行高度降解和LCN检材法医学STR分型，从而为解决法医学这一难题提供新的有价值的途径。同时，本研究建立的关键技术也为今后同类试剂实现国产化，打破国外产品在该领域的垄断地位奠定了坚实的基础。