DNA释放与壳聚糖之基因转染效率的研究

作为一种阳离子多聚物类基因转移载体，壳聚糖的生物相容性良好但转染效率较低，制约了其发展。为此，人们尝试了多种方法，力图通过提高壳聚糖将DNA导入宿主细胞的能力来增加其转染效率，虽有效但仍不够理想。我们前期的工作发现，壳聚糖与DNA形成的紧密复合物已具有强大的将DNA导入哺乳动物细胞的能力，进入细胞后DNA自复合物中的释放不佳可能是妨碍其转染效率的主要原因；增加细胞内壳聚糖的降解来促进入胞后DNA的释放则可显著提高所转染的报告基因的表达水平。本课题中我们将尝试采用壳聚糖酶基因共转染的方式来提高壳聚糖的转染效率，使壳聚糖成为一种高效的基因转移载体。还将通过双色荧光标记的方式对细胞内DNA与壳聚糖载体的解离情况进行直观的表征。