基于中药（民族药）提取物文库的斑马鱼活体高通量技术筛选抗非特异性炎症药物

The core of pathological inflammation is the change of the tissue damage induced by macrophage, neutrophil migration, accumulation at sites of inflammation. A part of inflammation, especially inflammation pathogen specific (such as a bacterial infection) can be obtained good effect against the treatment, but the autoimmune disease caused by inflammation has no good treatment method. Glucocorticoid is the main means of the treatment of autoimmune diseases, however, the use of corticosteroids long-term it can cause serious side effects limit its long-term application. Can imagine, if the selected drugs inhibit macrophage, neutrophil migration and accumulation in traditional Chinese medicine, will be an important progress of autoimmune inflammatory disease treatment. The application of molecular cloning and molecular biology technique established by transgenic zebrafish fluorescent protein labeled macrophages, neutrophils; establishing a model of acute inflammation, induced macrophage, neutrophil migration to sites of acute inflammation; observe inflammatory sites and the migration of macrophages, neutrophils were carried out under the fluorescent microscope counting. The candidate Chinese medicine with suppression of macrophage, neutrophil migration to inflammatory sites on the basis of traditional Chinese medicine library; and application of large model organism for validation and preliminary study of its mechanism.

炎症发生的核心病理改变是巨噬细胞、中性粒细胞在炎症部位的迁移、聚集致组织损伤。一部分炎症，尤其是致病病原体明确的炎症（如细菌感染）可以对抗治疗获得良好疗效，但自身免疫性疾病所致炎症等迄今仍没有良好的治疗方法。肾上腺糖皮质激素为治疗自身免疫性疾病的主要手段，然而长期使用肾上腺糖皮质激素所引起的严重副作用限制其长期应用。可以设想，如果能从中药中筛选出抑制巨噬细胞、中性粒细胞迁移和聚集的药物，将会是自身免疫性炎症疾病治疗的重要进步。该课题应用分子克隆等分子生物学技术建立由荧光蛋白标记巨噬细胞、中性粒细胞的转基因斑马鱼；构建急性炎症疾病模型，诱导巨噬细胞、中性粒细胞向急性炎症部位迁移，在荧光显微镜下观察炎症部位并对迁移的巨噬细胞、中性粒细胞数量进行计数。在建立中药（民族药）文库的基础上筛选具有抑制巨噬细胞、中性粒细胞向炎性部位迁移的候选中药；并应用大模式生物进行验证和对其作用机制进行研究

研究背景：迄今为止，炎症性疾病尤其是非特异性炎症性疾病的临床治疗仍十分困难，肾上腺糖皮质激素和免疫抑制剂可获疗效，但其严重的毒副作用和减、停药后反弹限制了临床使用。巨噬细胞向炎症部位的异常迁移和聚集是所用炎症性疾病主要的病理学特征，糖皮质激素正是通过抑制巨噬细胞的迁移、聚集而达到抗炎目的。我们长期的临床实践中发现一些中药和贵州民族药可能具有糖皮质激素样抗炎作用。不难设想，如果能从贵州民族药中寻找、发现、研究出具有明显抑制巨噬细胞迁移、聚集的抗炎作用而毒副作用很小的药物，那将是炎症性疾病在治疗上的重大进步。.研究方向：应用斑马鱼活体高通量筛选平台筛选中药（民族药）中抗炎药物.研究主要内容：1）确定候选中药（民族药）筛选文库，建立筛选平台。2）运用分子克隆技术构建转基因斑马鱼急性炎症模型。3）筛选出抑制斑马鱼巨噬细胞迁移的中药（民族药）。4）应用大模式生物（小鼠）对筛选出来的中药（民族药）进行验证。. 研究结果：1）建立了500余种中药筛选文库。2）成功构建了斑马鱼急性炎症疾病模型。3）成功筛选出3种具抑制巨噬细胞向急性损伤部位迁移的中药。4）在小鼠急性炎症模型上进一步验证了3种药物的抗炎作用。5）发表研究性论文2篇，其中核心期刊1篇。6）培养硕士研究生2名。