链霉菌是最高等放线菌和最重要的抗生素生产菌,具有类似真菌的复杂生活史,分类地位较为特殊,目前已成为研究进化和次级代谢的原核生物模型。NADP-依赖性单体异柠檬酸脱氢酶(IDH)的功能及分子进化机制的研究比较滞后。本项目将对几种链霉菌的单体NADP-IDH进行基因表达、纯化及酶学性质研究,为现在单体NADP-IDH劣势分布、而二聚体NADP-IDH优势分布提供更多依据或可能的解释。通过染色体同源重组构建包含单体NADP-IDH的重组菌株,检测单体NADP-IDH在三羧酸循环中是否具有二聚体NADP-IDH的功能。构建单体和二聚体IDH的分子进化树,以及利用酶定向分子进化技术对链霉菌单体IDH基因进行改造,以获取生化及酶学性质类似二聚体NADP-IDH(既热稳定又催化效率降低)的突变体酶,为单体IDH可能由二聚体IDH的祖先经过结构域融合演化而来的进化假说提供分子系统学支持及实验性证据。
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数据更新时间:2023-05-31
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