RSV感染诱导大鼠肾上腺髓质细胞发生神经元转变机制

大量的流行病学资料显示反复感染RSV的儿童出现喘息和哮喘的风险显著增高。目前的学说可以解释RSV感染后早期出现的喘息和哮喘，但无法解释婴幼儿RSV感染后数年甚至十余年喘息和哮喘的发生率仍显著高于正常人群。我们的前期工作提示NGF介导的神经源性炎症在RSV感染及哮喘中占有重要地位。新近，"功能冗余性"概念的提出为细胞分化障碍致肾上腺内分泌功能改变提供了理论支撑点，我们推测RSV感染相关性喘息的发生可能由于NGF启动肾上腺髓质细胞冗余性诱导其转化为交感神经元所致。 . 本项目拟对RSV感染哮喘动物模型和细胞模型进行干预，明确反复RSV感染后引起喘息和哮喘的冗余性机制，并用蛋白质组学方法筛选上述效应发生过程中发挥关键作用的蛋白质，为RSV感染相关性喘息的防治提供新的作用靶点。

摘要：RSV（Respiratory Syncytial Virus，呼吸道合胞病毒）感染是婴幼儿呼吸道感染最常见的病原体之一，大量的流行病学资料显示反复感染RSV的婴幼儿后期出现喘息(哮喘)的风险显著增高，其机制并不明确。我们的前期工作提示NGF介导的神经源性炎症在RSV感染及哮喘中占有重要地位。进一步研究发现哮喘状态下存在肾上腺素分泌异常，我们推测RSV感染相关性喘息的发生可能因NGF诱导肾上腺髓质细胞转化为交感神经元致血清中肾上腺素浓度下降有关。 . 本研究通过建立RSV感染大鼠模型、RSV感染细胞模型，用NGF、anti-NGF等进行干预，ELISA法检测各组大鼠外周血中肾上腺素、去甲肾上腺素浓度变化，RT-PCR和Western-blot分别观察肾上腺髓质细胞中神经元相关蛋白等神经结构的表达变化，免疫组化技术检测肾上腺髓质细胞NSE的表达变化，电镜和光镜观察肾上腺髓质细胞组织结构和超微结构的改变，进一步用蛋白质组学方法筛选和鉴定NGF诱导肾上腺髓质细胞转化为交感神经元过程中的差异蛋白。. 体内和体外实验均显示NGF作用后肾上腺髓质细胞发生向交感神经元转化，而蛋白质组学实验显示经二维凝胶电泳和质谱鉴定发现表达量上调的点为48个，下调点为37个，其中RhoGDIα蛋白和peripherin蛋白可能在此过程中发挥重要作用。因此，我们可以推论：RSV感染相关性哮喘的发作可能与NGF诱导肾上腺髓质细胞转化为交感神经使体内肾上腺素浓度下降而诱发哮喘有关。