鲤环境胁迫下糖皮质激素受体改变及其表达的营养调控机理

Stress in various environmental condition such as temperature,ammonia nitrogen,crowding and transportion) can be relieved by nutrition regulation.Expression of glucocorticoid receptor will be increased,signal transduction of glucocorticoid receptor and related approaches of antistress would be regulated by immune enhancement agent such as vitamin C,glutamine,Change trend and their relation among glucocorticoid receptor and it`s subunit（GR1a、GR1b和GR2）and heat stress protein(HSP60、HSP70和HSP90）and cell factor（IL-1β、IL-2、IL-6）will be dynamically analysised by technical means of molecular biology and cellular immunology. Change rule of related pathway of glucocorticoid receptor and cellular and molecular mechanism of nutrition regulation will be understood in acute and chronic environmental stress.The main reason of difference of anti-stress ability and the most suitable strategy of nutrition regulation will be explored.Scientific basis on adaption to different environment and feed control in different breeding stages will be provided .

拟利用营养调控能缓解不同环境胁迫（温度、氨氮、拥挤和运输）应激的特性，饲喂各种抗应激免疫增强剂（维生素C、谷氨酰胺二肽等），以期提高鲤的糖皮质激素受体的表达，调控糖皮质激素受体的信号转导和抗应激的相关途径，最终达到抗应激的目的。采用分子生物学、细胞免疫学等技术手段，通过动态分析急、慢性环境胁迫时糖皮质激素受体的亚基（GR1a、GR1b和GR2）、HSP家族（HSP60、HSP70和HSP90）及细胞因子（IL-1β、IL-2、IL-6）的变化趋势及相关性，以了解各种环境胁迫条件下以及急慢性不同程度的胁迫时，糖皮质激素受体相关通路的变化规律以及营养调控的细胞和分子机制，探索鱼类抵抗不同类型的环境胁迫能力差异的主要原因以及提出饲料营养调控的最适策略，为鱼类适应不同环境条件和养殖不同阶段的饲料调控提供基本的科学依据，为鲤生产潜力的最大发挥提供理论基础。

鱼类是水生低等变温脊椎动物，易受外界环境的影响，现代集约化养殖面临各种环境胁迫。研究各种不同种类环境胁迫（氨氮胁迫、低氧胁迫和拥挤胁迫等）和不同程度的胁迫（急性和慢性胁迫）糖皮质激素受体亚基、HSP家族、细胞因子的变化趋势及相关性。通过营养调控（谷氨酰胺、肉碱和抗菌肽的剂量和投喂模式）缓解环境胁迫。地衣芽孢杆菌XY-52 次级代谢产物Cyclo-(Phe-Tyr) 和Cyclo-(Phe-Gly)可调节鲤非特异性免疫指标和 IL-1 β基因表达。抗菌肽调控建鲤肝中IL-1β基因的相对表达量，提高血中IgM、IL-1a、IL-1β的含量及抗氧化酶、免疫相关酶的活性，增强建鲤的免疫功能。左旋肉碱对微囊藻毒素诱导的鲤免疫毒性和氧化应激具有较强的调节作用。得出低（20 g/L）、中（40 g/L）和高密度（80 g/L）养殖建鲤饲料Ala-Gln的适宜需要量为0.30-0.60%，0.60-0.88%，0.90-1.08%。通过丙氨酰-谷氨酰胺（0.5%和1.0%）投喂模式对低(20g/L)和高密度(80g/L)养殖建鲤的急性和慢性胁迫的影响。高密度拥挤胁迫下的建鲤下调GRmRNA（1a和1b）表达，尽管HSP70mRNA有所升高，但上调NF-kBmRNA和AP-ImRNA等促炎症转录因子，表明炎症造成免疫下调。随Ala-Gln在一定范围内增加，明显回调GR1mRNA(1a和1b)，HSP70mRNA显著表达。通过抑制促炎症转录因子如核因子NF-kBmRNA和激活蛋白-IAP-ImRNA的转录调节作用，从而产生抗炎效应，提高机体的免疫力。通过Ala-Gln体外对免疫抑制和应激模型下淋巴细胞的细胞和分子调控表明Ala-Gln是有潜力的鱼用抗应激免疫增强剂。氨氮胁迫建鲤饲料中GABA较为适合的添加水平为90mg/kg。低氧胁迫建鲤饲料中添加Ala-Gln和GABA较为适合的添加水平为3.6 g/kg Ala-Gln、54 mg/kg GABA。该胁迫机理和营养调控策略可为鲤生产潜力的最大发挥提供理论基础。