广西野生及特有柑橘种质资源遗传多样性研究

种质资源是新品种培育和农业生产可持续发展之必要物质基础。广西是我国柑橘重要的野生资源分布区域之一,在长期的栽培历史中形成了很多野生及特有的地方柑橘种质资源，但近年来资源流失风险逐年增加，而对该地区橘资源的收集保存及系统评价工作尚未开展。本项目拟在前期的工作基础上，系统收集并保存广西野生及特有柑橘种质资源皱皮柑、元橘、土橘等50余种，应用SSR、AFLP和cpSSR等分子标记技术研究其遗传多样性及系统演化关系，明确广西野生及特有地方柑橘种质资源的现状，为完善广西柑橘系统分类及种质资源科学利用奠定理论基础，并在此基础上建立广西野生及特有柑橘种质资源保存圃，直接服务于柑橘产业。本研究对保护和利用广西野生及特有柑橘种质资源具有重要的理论和实践意义。

为了解广西野生及特有地方柑橘种质资源的现状，为进一步完善广西柑橘系统分类及种质资源科学利用提供基础资料，2012-2015年间课题组采用实地考查与历史资料相结合的方法，开展资源调查和植物学性状观察，同时开展了分子标记分析，具体结果如下：.（1）开展资源收集，建立广西野生及特有柑橘种质资源保存圃。项目组实地调查了广西姑婆山野生柑橘资源以及百色市田林县、桂林市龙胜各族自治县、桂林市兴安县猫儿山、柳州市融水苗族自治县等6个宜昌橙群落，同时还引进保存其他原始柑橘类型。将收集到的50余份不同类型的柑橘种质资源采用嫁接保存的方式在广西特色作物研究院建立了广西野生及特有柑橘种质资源保存圃。.（2）积极开展广西野生柑橘资源植物性状观察，了解资源生物学特性。比较了34份不同基因型资源的叶形态，结果显示：枳与其他材料差异明显，为三出复叶，大翼橙类和柚类翼叶明显，剩余材料叶形态观测无明显差异。同时开展了92个柑橘花粉品种（资源）花粉量与花粉直径的测定与分析，发现不同资源花粉量和花粉粒大小存在差异。.（3）广西柑橘资源遗传多样性分子标记分析。利用12条ISSR引物对28份广西地方柑橘材料进行扩增，分析结果表明广西柑橘资源丰富，类型多样。同时利用22 对SSR引物和11对SRAP引物对34 份广西特有柑橘资源进行分析，结果表明：SSR 标记基本上能将宽皮柑橘、大翼橙类、柚类和柠檬类区分开来，大部分广西特有的宽皮柑橘类亲缘关系近，但枳壳、酒饼勒、阳朔金柑与其他材料未能有效区分；SRAP标记能将宽皮柑橘、大翼橙类、柚类等品种进行区分，柠檬类的广西土柠檬、黄黎檬与宽皮柑橘关系较近，而大翼橙类和柚类亲缘关系较近，但是阳朔金柑和酒饼勒2个属外种未能与其他品种有效区分；综合两种分子标记统计数据进行聚类分析，其结果与各个分子标记单独分析结果差异不大，均能将基本种类进行有效区分，但SRAP 标记多态性更好，信息量更加丰富，覆盖面积更广。.（4）积极研究广西野生柑橘生存状况，逐步开展野生柑橘资源的原生境保护。项目组重点对广西龙胜野生宜昌橙种群的动态和生存状况进行了分析，认为龙胜野生宜昌橙种群为衰退型，但可以通过疏除部分灌木层等措施提高幼苗存活率，以维持其生存与繁衍，为提高龙胜野生宜昌橙资源群体数量制定相关措施提供了依据。