在Knockout/knockin (KOI) 小鼠模型中IκBα基因极低表达的整体效应

IκBα是核转录因子NF-κB的唯一胞内抑制物，主导NF-κB控制细胞生长、存活、机体发炎、免疫应答、细胞凋亡等重要功能。它的不正确调控与肿瘤、心血管疾病、糖尿病等的发病机理密切相关。.本项目结合knockout(KO)和knockin(KI)基因修饰的两种方法（KOI），针对IκBα基因的调控成分，避免其KO小鼠在新生期死亡，而KI小鼠表型不够理想的缺陷，产生新一代的IκBα极低表达的KOI小鼠模型。期望获得病因明确、表型突出、寿命较短、发病早、病灶多、对基础研究和药物研发有巨大价值的小鼠模型。.通过对IκBα KOI小鼠胚胎成纤维细胞的相关基因表达分析、成体各器官相关基因表达分析、各器官病理学检查和分析、免疫系统相关分子生物学分析、相关基因表达协同性分析(发炎、细胞激动素、自身免疫、细胞凋亡和NF-κB信号通路的PCR Array 分析)，较全面地把握和了解 IκBα的整体生物学功能。

IκBα是核转录因子NF- κB的唯一胞内抑制物，主导NF- κB控制细胞生长、存活、机体发炎、免疫应答、细胞凋亡等重要功能。它的不正确调控与肿瘤、心血管疾病、糖尿病等的发病机理密切相关。.由于IκBα基因外显子部位的knockout小鼠会在新生期死亡，本项目则选择在IκBα基因的调控部位制备转基因小鼠。在IκBα基因第一个内含子中插入Neo基因，既是制备转基因小鼠过程中ES细胞转染阳性的选择标志，又是对此处调控功能的破坏；在IκBα启动子中引入最近3个κB结合位点的突变型，形成IκBα knockin小鼠；在IκBα启动子最近上游切除3 kb的调控序列，以期失去组织特异性表达功能，形成IκBα knockout小鼠。.按照上述策略，最终获得IκBαknockout/knockin 序列小鼠：IκBα pro-mut/Neo+、IκBα pro-mut/Neo- 、IκBα pro-cut/Neo+ 、IκBα pro-cut/Neo- 。转基因纯合体具有明显表型：个体较小、毛发蓬乱、尾巴皱裂、肢端肥大。这种IκBα knockout/knockin 序列小鼠可望成为研究多种疾病的基因相互作用的背景工具。.下一步将研究IκBα knockout/knockin 序列小鼠中IκBα基因在多器官中的表达调控机理，并应用此小鼠与其他转基因小鼠配合，制备鼻咽癌模型的可能性。