表没食子儿茶素（EGCG）调节PPARα，L-FABP，APOA5基因表达对脂质代谢的影响及临床意义

Coronary heart disease remains a serious threat to human health. Hyperlipidemia is a major risk factor for atherosclerosis and coronary heart disease. Healthy lifestyles, such as good eating habits can prevent hyperlipidemia. Green tea is rich in polyphenols and other substances, and polyphenols monomer EGCG is the most active molecule in green tea. Our recent study has confirmed that green tea can significantly reduce the adult serum levels of total cholesterol and LDL-cholesterol, but the mechanism of this effect is still unknown. Previous studies have found that tea polyphenols can activate α transcriptional factor PPARα in nuclei of the liver cells, and then affect lipid metabolism. Additionally, the expression of lipid metabolism signaling pathway genes, such as L-FABP and APOA5, is closely related to PPARα activation, which can regulate blood cholesterol and triglyceride levels. In the present study, we will do some in vitro experiments in cultured human monocytes and in vivo experiments in animals and use systemic biological methods to observe and evaluate the regulating effect of EGCG on PPAR, L-FABP, APOA5 gene expression related to lipid metabolism signal pathway. We will also do clinical intervention trials to validate the lipid-lowering effect of EGCG in patients with hyperlipidemia and normal controls. This study will explore the possible molecular mechanisms of EGCG lowering lipid levels and provide scientific proof of advocating for healthy lifestyles and preventing hyperlipemia and atherosclerosis. In this way, the study may have important clinical significance.

冠心病仍是威胁人类健康的重要疾病。高脂血症是动脉粥样硬化及其所致冠心病的主要危险因素。健康生活方式，如良好的饮食习惯可预防高脂血症发生。绿茶富含茶多酚等物质，其中茶多酚单体EGCG是绿茶中最具活性的分子。我们的前期研究证实，绿茶可显著降低成人血清总胆固醇和LDL-胆固醇水平，但机制尚不明确。有研究证实，茶多酚可通过激活肝细胞内核转录因子PPARα影响脂代谢，而脂代谢信号通路的重要基因L-FABP，APOA5的表达与PPARα激活密切相关，并可调节血胆固醇与甘油三酯水平。本研究通过体外细胞实验及在体动物实验,利用系统生物学的方法，观察EGCG对脂代谢信号通路相关基因PPARα，L-FABP，APOA5表达的调节作用，并在高脂血症患者和正常对照人群中进行初步验证，探讨EGCG调节脂质代谢的分子机制，为倡导健康生活方式、降低高脂血症发生从而预防动脉粥样硬化提供理论依据，具有重要的临床意义。

冠心病是危害人类健康的头号杀手，高脂血症是冠心病的主要危险因素，对血脂的干预已成为目前防治冠心病的重要策略。我们前期的研究证实绿茶（主要成分为茶多酚单体EGCG）能显著地降低血浆胆固醇水平，但具体机制不明。长链非编码RNA（Long nocoding RNA, lncRNA）是首一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，起初被认为是基因组转录的“噪音”。然而，近年的研究表明，lncRNA能以RNA的形式在多种层面上（表观遗传、转录以及转录后水平）调控基因的表达，参与了剂量补偿效应、基因组印记、细胞发育分化等重要生物学过程，lncRNA在心脏发育和心血管疾病中的作用也获得了大量研究的证实。以往研究也发现EGCG能在表观遗传层面上调控基因的表达（DNA甲基化），因此我们假设EGCG是否通过lncRNA调节相关血脂基因的表达。我们通过体外培养肝HepG2细胞，选取低密度脂蛋白受体(LDLR)为靶目标，确定EGCG达到最佳干预效果的刺激浓度及时间。EGCG干预后提取RNA,质检合格后，采用Affymetrix WT表达芯片（Human Transcriptome Array 2.0）检测出相对于对照组有显著表达差异的mRNA和lncRNA表达谱，芯片结果显示EGCG干预后，共有13个血脂相关基因mRNA表达上调, 29个血脂相关基因mRNA表达下调, 此外，共有85个lncRNA表达上调，180个lncRNA表达下调。通过生物信息学技术，对差异lncRNA进行重注释，预测这些差异lncRNA的靶基因并建立与差异mRNA的共表达网络，我们发现9个lncRNA在EGCG和对照组表达差异网络中起着中心作用，提示这些血脂相关基因可能受这些lncRNA的调节。最后我们通过qPCR进行验证， 共有5个lncRNA获得验证。以上结果表明EGCG对一些血脂相关基因的调控过程中，lncRNA可能起着重要作用。我们将来的工作是对这些lmcRNA进行功能学的验证（基因干扰和过表达），进一步阐明EGCG调节血脂基因的分子学机制，为倡导健康的生活方式，降低高脂血症的发生从而预防冠心病提供理论依据。.关键词：表没食子儿茶素没食子酸脂； 高脂血症；长链非编码RNA；基因芯片