牛膝多肽防治缺血性脑卒中的应用基础研究

据WHO报导，到2020年脑卒中将成为导致死亡和残疾的主要原因之一，其中67.3-80.5%属于缺血性脑卒中，缺血性脑卒中已成为影响人类健康的主要原因之一。然而，至今仍没有切实有效的神经保护剂应用于临床。中药是我国医药宝库，牛膝是常用中草药之一，本研究从牛膝提取液中分离出多肽成分，命名为牛膝多肽，采用HPLC分析作为牛膝多肽的特征鉴定和内在质量控制。在这基础上,从细胞、脑片、整体动物水平，应用OGD模型、兴奋性神经毒性、MCAO模型，观察神经细胞结构、活力，整体动物的感觉、运动、智力等了解牛膝多肽对缺血性脑卒中的保护作用。采用分子生物学技术、免疫荧光、Western Blotting、膜片钳技术、HPLC、质谱等，围绕谷氨酸兴奋毒性，特别是不同亚基、不同定位N-甲基D-天冬氨酸（NMDA）型谷氨酸受体，从分子、细胞等水平，探讨牛膝多肽神经保护机制及其作用于NMDA型受体不同亚基的有效成分。

据WHO报导，到2020年卒中将成为导致死亡和残疾的主要原因之一，其中67.3-80.5%属于缺血性卒中，缺血性脑卒中已成为影响人类健康的主要原因之一。然而，至今仍没有切实有效的神经保护剂应用于临床。中药是我国医药宝库，牛膝是常用中草药之一。牛膝多肽是从牛膝提取液中分离出多肽成分，采用HPLC分析作为牛膝多肽的特征鉴定和内在质量控制。在这基础上，本研究主要探讨牛膝多肽对缺血性脑损伤的保护作用及其相关机制。研究结果表明，牛膝多肽对实验性缺血性脑卒中有明显的治疗作用，能增加神经细胞存活，促进感觉、运动、平衡能力、学习记忆能力等的恢复。NMDA型谷氨酸受体的过度激活是缺血性脑卒中导致神经功能缺陷的关键因素。体外研究发现，牛膝多肽能抵抗NMDA诱导的神经元凋亡。实验结果揭示，牛膝多肽对NMDA受体过度激活引起的钙超载、ROS形成、Bax过表达、Caspase-3激活具有抑制作用，并对含NR2A、NR2B亚单位的NMDA受体具有不同的调节作用，对含NR2A亚单位的NMDA受体具有增强作用，而对NR2B亚单位NMDA受体具有抑制作用。进一步实验结果表明，牛膝多肽的E4成分具有神经保护作用，通过抗凋亡实现，而这一作用与bax、caspase-3相关，并与PI3K/Akt/Gsk3b 途径有关。这些研究结果为牛膝多肽应用于缺血性脑卒中临床提供了切实有效的实验依据。