用基因转移技术建立大脑皮层神经细胞系
基本信息
结项摘要
用基因转移技术建立大脑皮层神经细胞系。选用逆转录病毒载体fPGV1-MT，fPGV1前病毒是MOMLV，它是一个带有NeO选择标志，含多克隆位点（MCS），并组装人金属疏蛋白（hMT-11A）基因启动子的载体。外源基因-M-myc，用限制性内切酶EcoRI水解fPGV1-MT，得到线性fPGV1-MT分子。将载体fPGV1-MT与N-myc片段用T4DNA聚合酶补平，进行平头连接后转化受体菌JM109。在卡那霉素板上得到转化子，筛选出重组子。经酶切电泳分析证实N-myc已插入fPGV1-MT，成为fPGV1-MT-N-myc重组体。用构建的重组载体为Lipofectamine介导，转化小鼠胚13天的大脑皮层原代培养的神经细胞，用G418培养基筛选，得到了具有连续传代培养、能冻存复苏、免疫组化显示神经元特性的神经细胞系。
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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