LEA3蛋白是参与细胞耐脱水功能的重要蛋白质。本项目拟以大豆PM2 (LEA3)基因为材料,构建PM2蛋白的系列缺失克隆;采用大肠杆菌表达体系结合高盐、高渗处理,确定PM2蛋白的耐盐、耐渗透结构域。并进一步利用分子生物学和生物质谱技术,研究高盐、高渗胁迫诱导耐盐短肽(耐盐结构域)断裂为小肽的行为(如断裂点和小肽的分子量)。在离体条件下,研究分离纯化的PM2蛋白、耐盐短肽及其小肽对酶(柠檬酸合成酶和乳糖脱氢酶)的保护功能。结合圆二色谱和傅立叶变换-红外光谱分析,研究耐盐短肽和小肽的二级结构及引起多肽二级结构变化的诱导因素,进而阐明重组菌抗性与耐盐短肽和小肽间的关系,探明耐盐结构域、小肽的二级结构与抗逆功能的关系,揭示LEA3蛋白质在植物细胞耐脱水保护作用的分子机制。这是当前植物逆境功能基因组研究的前沿领域,也可为抗旱分子育种提供重要的理论依据。
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数据更新时间:2023-05-31
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