拟南芥CSN5B与VTC1互作的重要氨基酸对维生素C生物合成的影响

光对维生素C(Vc)的生物合成具有重要调控作用，但究竟哪些光相关因子调控了该过程不清楚。以Vc合成的关键调控因子VTC1为诱饵筛选互作蛋白，发现拟南芥光形态建成复合体COP9的一个功能未知亚基CSN5B与VTC1在体外和体内均能相互作用；且csn5b突变体中VTC1蛋白积累并导致Vc含量增加，表明CSN5B与VTC1的互作可能调控VTC1蛋白稳定性和Vc合成，但不清楚CSN5B哪些关键氨基酸位点影响与VTC1的互作。本研究在以上研究的基础上，拟通过分析VTC1和CSN5B的细胞组织表达、定位，为CSN5B1和VTC互作提供线索，进而采用生化、分子生物学及遗传学方法，体内、体外鉴定CSN5B与VTC1互作的关键氨基酸位点，剖析CSN5B关键氨基酸对VTC1蛋白稳定性及Vc合成的影响，探讨CSN5B特异性与VTC1互作及调控Vc合成的分子及遗传关系，为阐明光形态建成因子调控Vc合成奠定基础。

本项目的研究目标是通过鉴定CSN5B与VTC1的相互作用位点、剖析CSN5B与VTC1相互作用的关键氨基酸，揭示CSN5B与VTC1相互作用的分子和遗传基础，为探讨CSN5B对维生素C合成的调控途径和机理奠定基础。并在国际主流杂志上发表论文2-3篇；培养研究生3-5名。.通过四年的项目实施，研究发现细胞核内和细胞质内均存在VTC1-HA。进一步我们剖析了CSN5B可以在黑暗中促进VTC1 蛋白降解；并鉴定出VTC1中与CSN5B相互作用的关键氨基酸体；但与CSN5B高度同源的CSN5A与VTC1不存在相互作用。此外，我们的研究还发现，植物乙烯和ABA调控了维生素C的生物合成，为我们今后进一步剖析维生素C生物合成的调控奠定了基础。以上部分结果发表在Plant Cell，有些结果待发表。参加国际和国内学术会议5次；培养研究生5名。圆满地完成了项目的预期目标。