亲水作用色谱评价方法与分离效率研究

亲水作用色谱作(HILIC)为反相色谱的重要补充，适合用于强极性化合物的分离，近年来受到越来越多的关注和重视。当前，HILIC研究主要集中在应用和固定相发展方面，在其他方面关注较少，仍存在诸多问题。如何从种类繁多的固定相中选择"合适的"亲水作用色谱柱是HILIC使用者面临的主要问题之一。而分离效率偏低，导致峰容量和分辨率不足则限制了HILIC的广泛应用。本项目拟根据实际样品特性，建立HILIC柱评价样品体系和评价方法，选择典型的HILIC色谱柱，开展HILIC分离效率和色谱动力学研究，探索HILIC键合相对分离效率的影响规律。在此基础上，优化设计和合成新型HILIC固定相，并且开展HILIC在天然产物、寡糖、多肽和核苷等生物样品分离中的应用示范研究。本项目的研究工作不仅有助于理解HILIC的动力学过程和分离机理，而且对于发展高效HILIC固定相和拓展HILIC应用范围具有重要的指导意义。

亲水作用色谱(HILIC)作为反相液相色谱的重要补充，适合用于强极性化合物的分离，受到国内外学者越来越多的关注和重视。当前，HILIC研究主要集中在应用和固定相发展方面，在其他方面关注较少，仍存在诸多问题。如何从种类繁多的HILIC固定相中选择“合适的”亲水作用色谱柱是众多HILIC使用者面临的主要问题之一。而分离效率偏低，导致峰容量和分辨率不足则限制了HILIC的广泛应用。本项目依照研究计划设定的内容，建立了HILIC柱评价样品体系和评价方法，并且选择典型的HILIC色谱柱，开展HILIC分离效率和色谱动力学研究，探索HILIC键合相对分离效率的影响规律。同时，优化设计和合成新型HILIC固定相，并且开展了HILIC在天然产物、寡糖、多肽等生物样品分离中的应用示范研究。本项目的研究工作不仅有助于理解HILIC的动力学过程和分离机理，而且对于发展高效HILIC固定相和拓展HILIC应用范围具有重要的指导意义，取得了以下研究成果：.1) 构建了包含碱基、核苷、生物碱、有机酸、皂苷等多种类型化合的HILIC柱评价样品体系，样品结构多样性和涵盖面较大，能比较全面的反映出各类HILIC柱的色谱保留特性。.2) 建立了HILIC柱色谱保留特性的评价方法。采用核苷、碱基的简单样品体系在常用的酸性和中性条件下，以样品保留值和设定样品对之间的选择性来表征HILIC柱保留特性。采用多样品体系，测定不同HILIC柱的保留值，并且对样品结构参数进行多元线性回归，获得HILIC柱的特征保留参数，在此基础上优化和推荐了包含11个样品的HILIC柱特征参数测定方法。.3) 建立了HILIC柱分离效率和色谱动力学特性评价方法。设计了小分子碱基与核苷、糖苷以及皂苷等不同分子量和结构的样品体系，测定其在典型HILIC色谱柱上的分离效率和流速的影响。聚类分析结果与传质阻力大小比较十分吻合，很好的证实了HILIC模式下，传质阻力与键合相结构直接相关。此外，还发现HILIC动力学特性与化合物类型具有直接关系，含有糖单元的样品具有更大的传质阻力，原因可能是糖单元与固定相极性基团之间的直接相互作用（如氢键作用等）.4) 发展了新型两性离子HILIC分离材料，并且应用于寡糖、皂苷和多肽等的分离分析和纯化制备等应用。.5) 发表SCI文章6篇。申请相关发明专利3项，国际专利（PCT）1项并进入美国专利申请阶段。