热带斜压大气的地转适应问题研究

Vero细胞培养蓝舌病病毒内蒙分离株（BTV-NM），收毒后用异硫氰酸胍法和SDS法两种方法提取病毒RNA。按文献报道BTVVP2基因序列合成两对引物，逆转录聚合酶链式反应合成两个BTv-NMVP2基因片段cDNA。连接载体pGEM-T，转化大肠杆菌，获得两个片段cDNA的克隆。测序证明，此两片段序列分别与BTV-17VP2基因相应部分序列有60%和47%的同源率。以一克隆质粒为模板，随机引物法合成DIG标记的BTV-NMVP2cDNA探针，可检出50pg的病毒RNA样品，未感染BTV的Vero细胞RNA呈阴性。DIG标记BTV-NMVP2基因探针具有灵敏、安全、简便的特点，便于基层应用。