授粉后约五个月的中小粒种咖啡幼果经表面消毒后,挑取幼嫩胚乳进行植株再生诱导。以MS无机盐附加盐酸硫胺素10mg/l、胱胺酸50mg/l、肌醇120mg/l及燕糖40g/e为基本培养基(BM)。胚乳接种于BM+BA、KT、NAA、2、4—D等不同浓度配比的诱导培养基上进行暗培养。愈伤组织诱导率为84.6—96.4%。愈伤组织转到BM+KT0.5mg/l+NAA0.1mg/l和BM+BA0.5mg/l+NAA0.1mg/l的分化培养基上,可形成胚状体。将子叶型胚状体转到1/2无机盐的MS附加NAA或IBA0.5mg/l的生根培养基上可形成完整的胚乳植株。经细胞学鉴定,杂种胚乳和小粒种自交胚乳分别为2n=4x=44的四倍体和2n=6x=66六倍体。该法的优点是通过直接杂交和胚乳培养捷径面获得所需的四倍体杂交后代,可以缩短育种年限。
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数据更新时间:2023-05-31
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