适配体与穿膜肽双介导新型纳米基因载体的构建及其靶向治疗脑胶质瘤研究

为了能使外源基因成功跨越血脑屏障并有效地转染到瘤细胞中，本项目拟将具有高特异靶向胶质瘤的寡核酸适配体TTA1（CCTGCACTTGGCTTGGATTTCAGAAGGGAGACCC）及跨血脑屏障阳离子多肽SynB（RGGRLSYSRRRFSTSTGR）同时作为靶向基团，连接至具有良好生物相容性和生物降解性的明胶-硅氧烷(GS)纳米基因载体材料上，并对其PEG化，设计成新型的TTA1-SynB-PEG-GS纳米基因载体。该基因载体系统国内外未见相关报道。本项目将首先考察载体材料的优化合成条件，并将重点考察适配体TTA1和穿膜肽SynB介导的纳米载体跨血脑屏障入脑的能力及其对基因转染效率和表达水平的影响，从而为非病毒基因载体的研究和开发提供一种新的途径。还将从细胞、动物水平考察该新型基因载体运载干扰基因抗胶质瘤的效果，为该体系用于胶质瘤基因治疗的进一步深入研究提供理论依据。

胶质瘤为原发于脑部的恶性肿瘤，占了脑部肿瘤的80％，目前仍是最致命的癌症形式。近些年基因治疗的广泛开展，为脑胶质瘤的治疗提供了新的契机，因此高效性基因载体的研究变成了重中之重。作为非病毒药物载体中重要的一员，纳米粒子发挥着无可替代的作用，而其中的明胶-硅氧烷杂化材料，由于具有低毒性、可降解性、表面易修饰性以及易重复合成等优点在提高药物靶向性方面具有非常广阔的应用前景。本研究构建了一种经阳离子多肽和适配体共修饰的不但能够很好的被细胞摄取并能靶向脑肿瘤细胞的纳米粒子基因载体系统。在本研究中，首先成功制备出纳米粒子表面有阳性电荷、粒径较小、分散性好，具备作为药物、基因等治疗因子的载体；其次从SD乳鼠脑皮质成功提取、培养出脑血管内皮细胞（BCEC）和脑星型胶质细胞（AC）并构建了接触共培养体外BBB模型；最后以荷瘤裸小鼠为实验载体，证明 GS-PEG-SynB-TTA1 NPs停留在裸鼠血液循环时间较长，半定量分析能够穿透血脑血瘤屏障，并且靶向脑胶质瘤。因此该新型纳米载体是一种潜在的胶质瘤治疗基因及药物的靶向载体，具有广阔及良好的应用前景。