肾小管细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻对草酸钙结石粘附性的影响及其机制

草酸钙致肾小管细胞损伤后，细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻增加了对结石微晶体的粘附性。本课题在此基础上，拟研究随草酸钙浓度及作用时间的不同，用荧光探针测定细胞膜磷脂移位酶和磷脂爬行酶(PLSCR1)活性的动态变化并讨论其与细胞内钙离子的相互关系；测定PS合成酶活性，RT-PCR方法测定PLSCR1以全面分析PLSCR1活性变化的机制；应用PLSCR1-SiRNA来有效抑制PLSCR1基因表达和Ca2＋螯合物（BAPTA）抑制细胞内游离钙浓度的方法，进一步证实肾小管细胞PLSCR1在PS外翻中的重要作用及其对细胞内Ca2＋的依赖性；应用动物模型观察PS在肾小管细胞膜表面出现的动态变化并测定草酸钙结石病人尿中和结石中的PS。本项研究拟从分子细胞水平、动物和人体等方面探讨细胞膜失去不对称性和PS外翻的机制，进而部分阐明尿石症的早期发病机理，为尿石症的临床治疗和预防提供理论依据。