抗NMDA受体亚型NR2抗体介导的狼疮脑病免疫发病机理研究

To research the immunopathogenesis mediated by antibodies against N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor types NR2a or NR2b in neuropsychiatric lupus erythematosus.The anti-NR2 antibodies may be one of the early diagnositic index with NPSLE. Anti-NR2 antibodies in NPSLE patients who had cognitive and psychological disturbances were significantly higher than other NPSLE patients. High anti-NR2 antibody levels in NPSLE patients' CSF revealed the poor prognosis. The anti-NR2 antibody may cause a loss in rat brain endothelial barrier integrity through activation of NMDA receptor. Our observation suggested that anti-NR2 antibody may contribute to cognitive and psychological disturbances through an NMDA receptor mediated loss of endothelial barrier. Glucocorticosteroid such as dexamethasone could protect the permeability of blood-brain barrier in vitro.

狼疮脑病是系统性红斑狼疮严重的并发症及主要的死亡原因，发病机制不清，尤其对于存在认知功能障碍、记忆力减退的狼疮脑病患者，其发病隐匿，很难在疾病早期对其进行有效的治疗。研究发现NMDA（N-甲基-D-天门冬氨酸）受体活性的改变可引起学习与记忆能力的变化，为此，本课题研究狼疮脑病患者血清中的抗NMDA受体亚型NR2抗体，是否通过模拟兴奋性神经递质的神经毒作用，与脑内皮细胞上的NMDA受体结合，引起血脑屏障功能的破坏，从而使狼疮脑病患者出现认知功能能障碍、记忆力减退的临床表现；建立体外血脑屏障模型，研究该抗体对于血脑屏障模型通透性及NMDA受体信号传导通路的影响；同时构建狼疮脑病的动物模型，将抗NR2抗体及NMDA受体拮抗剂作用于该模型，从基因水平评价该抗体对于狼疮脑病动物模型脑内皮细胞上NMDA受体的作用，从而为今后新药的研发及靶向定位治疗奠定基础。

狼疮脑病是系统性红斑狼疮严重的并发症及主要的死亡原因，研究发现NMDA（N-甲基-D-天门冬氨酸）受体活性的改变可引起学习与记忆能力的变化，为此，本课题研究狼疮脑病患者血清中的抗NMDA受体亚型NR2抗体，是否通过模拟兴奋性神经递质的神经毒作用，与脑内皮细胞上的NMDA受体结合，引起血脑屏障功能的破坏，从而使狼疮脑病患者出现认知功能能障碍、记忆力减退的临床表现。.本研究首先检测血清和脑脊液中抗NR2抗体与系统性红斑狼疮患者的相关性；同时将Wistar大鼠与MRL/lpr鼠（狼疮脑病模型鼠）进行分组，分为抗NR2抗体处理组、NMDA受体拮抗剂处理组、NMDA受体激动剂处理组，对其进行脑微血管内皮细胞的原代培养；检测脑微血管内皮细胞上NMDA受体的表达；同时Morris水迷宫实验检测经过不同处理前后狼疮脑病模型鼠的认知功能、记忆力的变化；用Q-PCR检测NMDA受体mRNA的表达；Western blot检测NMDA受体的蛋白水平。.本研究结果提示：检测系统性红斑狼疮患者血清中的抗NR2抗体水平对于神经精神性狼疮患者具有初步筛选作用；血清中抗NR2抗体的水平与弥漫型神经精神性狼疮患者相关，尤其是高滴度的抗体水平与存在认知功能障碍、记忆力减退的器质性脑病患者高度相关；神经精神性狼疮患者脑脊液中的抗NR2抗体水平与血清中的抗NR2抗体水平存在显著的阳性相关；脑脊液中高滴度的抗NR2抗体提示出现器质性脑病的狼疮患者预后不良；在Wistar大鼠及MRL/lpr鼠脑微血管内皮细胞上存在NMDA受体亚型NR2，这为进一步检测抗NR2抗体对血脑屏障通透性的影响奠定了基础；给予NMDA受体拮抗剂干预后的鼠脑微血管内皮细胞上NMDA的表达减少，给予L-谷氨酸（NMDA受体激动剂）干预后鼠脑微血管内皮细胞上NMDA的表达增加，同时给予抗NR2抗体干预后鼠脑微血管内皮细胞上NMDA的表达同样有所增加，这提示我们抗NR2抗体可以作为NMDA受体的激动剂参与表达。.本研究初步结论：抗NMDA受体亚型NR2a/2b抗体作为一种受体激动剂，在兴奋性毒水平，通过激活血脑屏障——脑微血管内皮细胞上的NMDA受体，导致血脑屏障通透性增加，从而使得狼疮脑病模型鼠的记忆力、认知功能下降；检测神经精神性狼疮患者的抗NR2抗体的水平对于神经精神性狼疮患者的诊断、疗效评价以及预后判断有所帮助。