p38beta磷酸化Raptor调节mRORC1的活性研究

基本信息
批准号:31070688
项目类别:面上项目
资助金额:35.00
负责人:周化民
学科分类:
依托单位:厦门大学
批准年份:2010
结题年份:2013
起止时间:2011-01-01 - 2013-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:谢昌传,吴晓男,汪雪坤,田丽丽,李渊越,吴剑锋,蒙丹
关键词:
Raptorp38beta磷酸化mRORArsenite
结项摘要

mTOR 信号通路(mTORC1)在细胞生长、繁殖、代谢、自噬和个体发育等多个生物学过程中发挥关键性的作用。TSC1/TSC2复合物是mTOR上游重要的复合物,它能整合多种信号从而调节mTOR的活性。但某些信号调节mTOR活性并不通过TSC1/TSC2复合物。 近年来的研究显示Raptor有多个可能的磷酸化位点,通过磷酸化参与调节mTORC1的活性。我们发现,在p38beta-/- MEF细胞中,Arsenite刺激的S6K的磷酸化减少,Arsenite刺激的S6K的磷酸化是mTOR依赖的,且Raptor能和激活的p38beta相互作用。本项目拟通过RT-PCR、基因克隆、基因突变、DNA转染、病毒的包装感染、免疫共沉淀、siRNA干扰技术、大肠杆菌原核表达、流式细胞仪检测方法等探讨p38beta如何介导的Raptor磷酸化调节Arsenite刺激的mRORC1的活性。

项目摘要

mTOR 信号通路(mTORC1)在细胞生长、繁殖、代谢、自噬和个体发育等多个生物学过程中发挥关键性的作用。TSC1/TSC2复合物是mTOR上游重要的复合物,它能整合多种信号从而调节mTOR的活性。但某些信号调节mTOR活性并不通过TSC1/TSC2复合物。 近年来的研究显示Raptor有多个可能的磷酸化位点,通过磷酸化参与调节mTORC1的活性。我们发现,在p38beta-/- MEF细胞中,Arsenite刺激的S6K的磷酸化减少,Arsenite刺激的S6K的磷酸化是mTOR依赖的,且Raptor能和激活的p38beta相互作用。p38亚型成员敲除的MEF细胞中,Arsenite刺激的S6K的磷酸化状况显示,仅p38特异介导Arsenite刺激的mTOR信号;不同的胞外刺激中,p38特异介导Arsenite诱导的mRORC1的活性。在分析p38和Raptor相互作用时发现,p38抑制剂并不抑制p38/Raptor相互作用;使用删除和点突变方法,确定了S863是Raptor的p38磷酸化位点。MKK3/6/ p38信号通路涉及Arsenite诱导的Raptor磷酸化;Rapamycin并不抑制Arsenite诱导p38beta磷酸化Raptor。总之,我们发现p38以刺激依赖性方式与Raptor相互作用并磷酸化RaptorS771与S863位点,调节mTORC1的活性,细胞能以不同的策略应对不同的坏境条件。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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