DCC/Dab1在胼胝体发育中的作用研究

胼胝体（Corpus Callosum，CC）是联系大脑左右半球的主要神经纤维，对传递神经信息和协调两半球活动发挥重要作用。CC发育主要取决于新皮质胼胝体投射神经元（Callosal projection neurons, CPN）在皮层中的准确定位、神经突起的生长以及轴突的正确导向，以便建立精细的神经连接。通过体内基因沉默和DCC自发突变鼠表型分析，我们推测Netrin-1受体DCC和Reelin下游分子Dab1协同作用于CC发育。本课题拟通过GST-pulldown、免疫共沉淀等相互作用研究，阐明DCC与Dab1相互作用，参与Dab1介导的皮层神经元迁移；进一步，表达于投射神经元生长锥的Dab1参与Netrin-1介导的轴突延伸和导向。DCC功能缺失阻断了Dab1介导的轴突投射终止信号，导致轴突投射的异位终止或错误终止。本研究结果将有利于阐明胼胝体发育的分子机制及相关疾病的治疗。

胼胝体是哺乳动物中最大的神经纤维联合结构，连接左右大脑半球，在信息传递中具有重要作用。胼胝体发育过程主要包括两个阶段：1，相关神经元正确迁移定位；2，轴突导向正确投射。胼胝体发育不完全可导致多种疾病发生，且没有可行的治疗手段。因此，研究胼胝体发育机制有利于阐明神经环路形成过程，以及预防和治疗胼胝体先天发育不良疾病。.Netrin/DCC在脊髓性神经轴突导向的中的相关作用已得到过大量报道，Netrin或DCC缺失的小鼠，均表现为轴突投射异常。但是该相关因子在胼胝体发育中的作用尚未有详细报道。同时，我们注意到DCCkanga突变鼠中神经迁移也出现了明显的异常， 这一迁移异常与reeler突变鼠表型相似。Dab1是Reelin信号通路的胞内分子，该因子与DCC存在明显的共定位和功能相关性，因子Netrin/DCC信号通过可能通过Dab1来调节胼胝体的发育过程。.我们的研究结果显示，DCC分子在神经元的迁移过程中具有重要作用，DCC沉默可导致明显的迁移阻滞现象。进一步的研究表明，该迁移阻滞不是由于神经元的增殖和分化异常导致，而主要是由于神经元从多极向双极的形态转化过程出现了问题。DCCkanga突变鼠与DCC沉默具有相似的迁移阻滞现象。为了进一步研究Netrin/DCC的下游信号分子，我们选取了Dab1胞内接头蛋白作为研究对象。Dab1作为Reelin信号通路的主要胞内接头蛋白，在神经元迁移中的重要作用已得到一定的研究。在免疫共沉淀和GST-pulldown实验中，Dab1分子与DCC均有明显的相互作用。该相互作用依赖于DCC胞内段的P3结构域以及Dab1的PTB结构域。同时DCC胞内段的磷酸化位点以及Dab1的磷酸化位点对于Netrin/DCC信号通路的传递具有决定作用。更进一步的分析表明，Netrin/DCC信号通路通过Dab1分子来影响Src激酶的活性，进而导致了相关迁移缺陷的发生。.本课题的研究结果明确指出，Netrin/DCC信号通路不仅调节神经元的轴突投射过程，同时对于神经元的迁移过程也具有重要调控作用。Netrin/DCC通路主要通过Dab1接头蛋白来调节Src激酶活性，进而影响神经元迁移过程。该研究结果不仅扩展了Netrin/DCC信号通路的相应功能，同时也为Reelin和Netrin信号通路对于神经元的迁移的协同调控提供了的新的思路。更进一步阐明了胼胝体