miRNA在PRRSV感染PAM中作用及对不同猪种PPRSV易感性调控研究

PRRSV是一种严重危害养猪业的病毒。不同猪种对PRRSV易感性存在差异，我国一些地方猪种对高致病性PRRSV表现出一定抗病力。miRNA在免疫应答和疾病发展中发挥重要调控作用。PAM既是PRRSV感染的主要靶细胞，又是重要免疫细胞。因此，本研究拟对梅山、清平、长白和皮特兰仔猪PAM进行收集，体外感染高致病性PRRSV-Wuh1毒株，绘制病毒复制动力学曲线，评价不同猪种易感性，利用基于Illumina高通量测序的小RNA数字化分析技术获得不同猪种PAM感染PRRSV前及感染关键时间点miRNA表达谱，筛选和鉴定对PRRSV感染具有重要调控功能的miRNA，并进行靶基因鉴定及调控网络分析，分析miRNA在PRRSV感染PAM中的作用及对不同猪种PPRSV易感性的调控，为我国优异种质资源进一步开发利用提供新思路，为今后抗病育种奠定基础，同时有助于建立miRNA新疗法，为PRRS防治提供新思路。

PRRSV是一种严重危害养猪业的病毒。不同猪种对PRRSV易感性存在差异，我国一些地方猪种对高致病性PRRSV表现出一定抗病力。miRNA在免疫应答和疾病发展中发挥重要调控作用。PAM既是PRRSV感染 的主要靶细胞，又是重要免疫细胞。因此，本研究对梅山、清平、长白和皮特兰仔猪PAM进行了收集，体外感染高致病性PRRSV，绘制PRRSV在梅山猪、清平猪、长白猪、皮特兰猪PAM中的复制动力学曲线，发现四个品种具有相似的病毒复制趋势，在前36h随着感染时间的增加PRRSV 拷贝数呈逐步上升的趋势，在36小时到达高峰。皮特兰猪对PRRSV的最易感，其次是长白猪、梅山猪和清平猪。利用基于Illumina高通量测序的小RNA数字化分析技术获得了不同猪种PAM感染PRRSV初期（9h）、中期（36h）、末期（60h）关键时间点及同时期点未感染的PAM miRNA表达谱，分析了同时间点不同猪种PAM间、同一猪种不同感染时间点间及PRRSV感染前后的miRNA表达差异。对差异表达的mir-29b、miR-142-5p、miR-99b、miR-146a-5p、let-7家族（let-7a, let-7c, let-7e, let-7f, let-7g, let-7i）等进行了分离、表达谱分析，并对let-7家族miRNA靶基因进行了分析、鉴定及调控网络分析，研究了let-7家族miRNA对PRRSV感染的调控。除此之外，还研究了USP18对PRRSV复制的调控以及猪TXNIP基因等。到目前为止，发表SCI收录论文4篇，国际会议论文3篇，国内会议论文1篇，硕士学位论文2篇，申请并获授权专利1项，参与出版专著1部，取得了阶段性的研究成果，达到了预期目标，为今后抗病育种、建立PRRS防治新策略奠定了基础。