伪狂犬病毒PK和gG基因双缺失疫苗株的构建

对广东省繁殖猪群中的流产、死胎与不育原因进行了调查，采集了流产胎儿等病科，进行病毒分离与鉴定，结果从多株有细胞病变的可颖培养物中获得一株猪伪狂犬病毒。在此基础上建立了PCR检测技术。利用该技术分别扩增了HB株的gG-gD基因片段和广东株TK基因片段并进行了分子克隆和测充，与已知毒株序列进行了比较，其基因同源性达94%以上。将gG-gD片段与PK基因进行了拼接，并在中央分别插入了两种不同的报告基因，构建成两种不同筛选标记的转移载体，并与病毒（DNA）共转染细胞筛选到能出现细胞病变的重组病毒株，用PCR对其进行了扩增，能再次得到相应产物，表明已获得重组毒。