基于eNOS信号通路的丹红注射液血管功能多靶点调节作用机制研究

血管功能异常是导致心血管疾病发生的关键因素之一，以往研究显示活血化瘀中药对维持血管功能具有显著的作用。本课题组对活血化瘀中药丹红注射液化学成分进行反向对接药效团虚拟筛选，发现eNOS信号转导通路可能为其作用的关键环节。由此，本项目以eNOS信号转导通路为切入点，利用eNOS基因敲除小鼠，离体和在体相结合，通过计算模拟、离体靶点-通路筛选及基因调控网络分析等多种先进研究手段，阐明丹红注射液多靶点调控eNOS信号通路在血管功能调节中的作用，首次构建活血化瘀方药"活性成分-靶点-通路-疾病"网络。实现在中医理论指导下，以活性为导向，中药化学信息与生物信息综合分析的中药有效成分及靶标发现，并以此探索适合复方中药研究的成分-靶标-通路筛选方法，揭示丹红注射液多靶点整合调节作用的复杂机制，为阐明中药活血化瘀作用的科学内涵做出贡献。

本项目选取活血化瘀中药-丹红注射液作为研究对象，在明确其主要化学成分的基础之上，借助分子对接筛选平台进一步确定有效组分及作用靶点通路。以eNOS相关信号转导通路为切入点，利用eNOS基因敲除小鼠，离体和在体相结合，通过计算模拟、离体靶点-通路筛选及基因调控网络分析等多种先进研究手段，阐明丹红注射液多靶点调控eNOS信号通路在血管功能调节中的作用。.1、鉴定得到丹红注射液中23种化学成分，其中丹参16种，红花7种。经过分析发现，其23种化学成分作用约145个靶点，参与约91条信号通路。.2、研究丹红注射液对eNOS小鼠胸主动脉血管环的舒张作用，结果表明在eNOS KO小鼠中，2、10ul/mL的DHI可显著抑制KCl、NE、5-HT诱导的内皮完整的胸主动脉环，具有内皮依赖性舒张血管作用，并且可能通过PGI2途径舒张血管。.3、根据小鼠全基因组芯片实验结果，eNOS KO小鼠与野生型小鼠相比，共调节基因918条，其中上调398条，下调520条；丹红注射液三剂量组分别调节基因1093、432及381条，阳性药物缬沙坦与eNOS KO小鼠相比调节基因471条。丹红注射液的主要调控通路涉及KEGG、细胞粘附分子、抗炎等。.4、采用Arraytrack 等软件，整合分析模拟筛选、基因芯片结果，包括分析重合靶标、靶标-靶标与靶标-通路关系等，绘制了丹红注射液有效成分-靶点-通路-疾病的复杂网络。确定丹红注射液调节eNOS 相关通路有效成分及机制，从调节eNOS 相关通路角度阐明中药活血化瘀作用的科学内涵。.顺利完成项目研究内容，发表论文4篇，其中SCI2篇，中文核心期刊论文2篇。毕业博士研究生1名，硕士研究生2名，完成计划任务。