银耳伴生菌香灰菌的遗传鉴定与特性评价

香灰菌作为银耳伴生菌，长期广泛应用于银耳菌种制作和生产，但人们对于香灰菌 "种"的认识十分模糊，对于其分类地位、生物学特性、与银耳配对原理和选育方法等均缺乏系统的研究，面对生产中银耳产量降低、香灰菌分解能力减弱、老化退化严重的现状，缺乏有效的应对方法。针对以上具体问题和生产实际迫切需求，拟通过项目的实施，利用传统分类与3种分子标记技术相结合，相互补充，确定香灰菌的分类地位，建立指纹图谱，为后继种质资源的分离、鉴定和开发利用奠定基础；同时从生长发育特性、酶系特异性和遗传特异性3个层次对不同来源的香灰菌进行特异性评价，探索这种特异性与其与银耳配对机理的相关性，指导后继香灰菌新品种的选育，保障银耳产业的健康发展。

针对银耳生产中对伴生菌香灰菌的分类地位不清，特性不明，作用机理不明确的现状，开展了香灰菌的遗传鉴定、生物学特性研究和交叉配对能力分析。ITS序列及β-tubulin序列分析结果显示，我国主栽银耳的配对香灰菌与Annulohypoxylon stygium 可判定为一个种，但源于四川通江、攀枝花和湖北房县的野生香灰菌分别与Annulohypoxylon bovei 和Annulohypoxylon nitens有较近的亲缘关系，显示银耳段木中羽毛状产生黑色素的菌株并非单一物种。银耳段木上常生长的子囊壳为Annulohypoxylon annulatum ，不是香灰菌的有性阶段。.对主栽银耳和香灰菌的ISSR遗传多样性分析结果显示，供试银耳和香灰菌菌具有较丰富的遗传多样性。不同来源的银耳和香灰菌可通过交叉配对出耳，菌株之间的配对出耳能力有明显差异，且香灰菌遗传差异的大小不是配对与否的原因，与传统认为的“专一配”对观点不完全一致。在香灰菌与银耳的相互作用中，香灰菌Laccase 活性在生长初期迅速达到最大值，然后即呈下降趋势，CMC酶活性上升较快，并维持在较高水平，均为协同银耳作用的关键酶类。主栽银耳配对香灰菌Annulohypoxylon stygium 培养最适温度30℃，pH7，可广泛利用各类碳源和氮源。野生香灰菌在培养温度、pH和碳源、氮源的利用等方面均与Annulohypoxylon stygium差异显著。银耳与香灰菌的相互作用机理值得进一步深入研究。