彝药塔若散干预易损性斑块调节胶原合成/降解失衡的机制研究

胶原的合成减少和/或降解增加是易损性斑块不稳定性的重要机制，目前从干预胶原合成与降解的角度治疗易损性斑块尚未见报道。前期证候学研究发现风证与CAS易损性斑块密切相关，结合彝医对"咪西豪"病（包括现代医学的CAS易损性斑块等）的"觅嗨唉格"病机认识，提出"风邪内动，血脉痉挛"为斑块易损性的病机假说，建立"息风止痉"法为稳定易损性斑块的首要措施。在该病机理论指导下，本研究以胶原合成与降解为切入点，应用实时荧光定量RT-PCR、Western blot、ELISA、免疫组化及光、电镜等技术，对胶原合成与降解的关键酶P4Hal、EMMPRI、MMPS-14等含量变化、易损性斑块的组织病理学形态变化进行动态观察，研究彝药塔若散（松寄生、花椒树寄生）稳定易损性斑块的主要作用机制与靶点，为临床从胶原代谢角度稳定CAS易损性斑块提供实验依据。

以彝族医学理论为指导，结合彝医对“咪西豪”病（包括现代医学的CAS易损性斑块等）的“觅嗨唉格”病机认识，提出“风邪内动，血脉痉挛”为斑块易损性病机假说，“息风止痉”法为稳定易损性斑块的首要措施。塔若散为代表方剂从胶原合成与降解为切入点，通过复制金黄地鼠高脂血症伴随早期AS模型进行塔若散药效学研究；通过复制高脂血症大鼠早期AS模型研究塔若散的作用机制；通过复制ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块的体内模型及ox-LDL诱导的内皮细胞离体动脉粥样硬化样损伤模型研究塔若散干预易损性斑块调节胶原代谢的机制，应用实时荧光定量RT-PCR、western blot、Elisa以及HE、免疫组化染色等方法，对诱发动脉粥样硬化相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、ICAM-1、MIF，胶原代谢相关酶 P4Hα1、MMP-9、MMP-14、CD68等含量变化及易损性斑块组织病理学形态变化进行了观察。.体内实验研究表明：塔若散对血清中TG、TC、ox-LDL均有明显降低的作用、可明显改善血脂情况；从病理形态学明显改善动脉粥样硬化的病理变化；对影响动脉粥样硬化形成的相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1具有明显的抑制作用，同时对影响动脉粥样硬化斑块稳定性促进胶原降解的相关因子MMP-9、MMP-14、CD68具有显著抑制的作用，对抑制胶原降解的相关因子TIMP-1、SM-α actin具有显著升高作用，对胶原合成关键酶P4Hα1的表达具有促进作用。.离体实验研究表明：通过离体细胞模型筛选出塔若散不同极性部位中30％乙醇部位为有效部位并对其药效及机制方面做了研究，显示塔若散对ox-LDL诱导的内皮细胞离体动脉粥样硬化样损伤具有保护作用，能显著提高ox-LDL诱导的离体动脉粥样硬化样损伤内皮细胞的活力；对诱发并促进AS形成与发展的炎症因子ICAM-1、MIF具有抑制作用，同时对胶原合成关键酶P4Hα1的表达具有促进作用，对胶原降解相关酶MMP-14具有显著抑制作用。.综上所述，彝药塔若散通过抑制动脉粥样硬化的形成与发展，同时降低胶原降解，促进胶原合成，从而增加易损性斑块的稳定性。.本次研究完成了课题设计中内容，并培养硕士研究生4名，发表文章共12篇。