脂素Lipin-1在糖尿病周围神经病变中的调控机制

糖尿病周围神经病变是2型糖尿病最为常见和复杂的并发症，其患病率高,危害大,常规治疗效果差。其发病机制目前尚不完全明确。近年来学者们发现脂肪因子也和糖尿病周围神经病变的发生发展密切相关。Lipin-1是一种新发现的脂肪因子，在糖尿病的发病过程中具有重要的作用，而Lipin-1缺乏的fld小鼠存在严重的周围神经病变。本课题通过构建Lipin-1 Tg小鼠模型，提高/沉默Lipin-1基因表达，观察Lipin-1基因水平变化所导致的小鼠坐骨神经形态学改变以及对雪旺细胞相关功能指标的表达和酶活性的影响；同时密切结合临床，分析糖尿病患者中Lipin-1水平与周围神经病变发生发展的相关性。旨在探讨Lipin-1在糖尿病周围神经病变中的调控作用，从而寻求一条预防和治疗糖尿病周围神经病变的新途径。

目的: 1. 观察高脂环境下，大鼠肝脏AMPKa、磷酸化AMPKa活性和lipin1基因及蛋白表达改变。2. 研究高脂高糖喂养加STZ诱导的2型糖尿病大鼠周围神经病变的特点。3.探讨lipin1在糖尿病周围神经病变中的可能作用机制。4. 观察高浓度葡萄糖对雪旺细胞增殖及凋亡的影响并探讨可能机制。方法：1.Wistar大鼠高脂高糖喂养并腹腔注射STZ制备2型糖尿病大鼠模型。造模成功后10只糖尿病大鼠转染lipin1高表达载体。喂养20周后处死大鼠,检测大鼠坐骨神经传导速度,留取双侧坐骨神经,观察糖尿病大鼠坐骨神经形态学变化及神经生长因子等改变。2.糖尿病大鼠造模后检测肝脏AMPKa、磷酸化AMPKa、lipin1基因、蛋白表达水平；3.在细胞水平应用MTT及流式细胞技术观察高糖（100mmol/L）对RSC96细胞增殖及细胞凋亡的影响及高糖对lipin-1、神经生长因子蛋白表达的影响。结果：1. HF组大鼠血清甘油三酯和胆固醇均显著增高。2. HF组P-AMPKa蛋白表达水平明显降低。3.糖尿病模型组大鼠坐骨神经传导速度明显减慢(P<0.01)。4.糖尿病周围神经病变组形态学改变明显，有髓神经纤维髓鞘发生分离、变性融合 ,轴突内电子密度不均匀。Lipin1转染组大鼠有髓神经纤维髓鞘板层结构基本完整。5.高糖对RSC96细胞增殖具有显著抑制作用（P<0.05），高糖组细胞晚期凋亡率（12.4±0.6557）%明显增加。结论：1. 高脂环境可诱导大鼠胰岛素抵抗，导致脂毒性发生，可降低大鼠肝脏磷酸化AMPKα活性和lipin1的表达。2. 2型糖尿病大鼠造模20周后出现周围神经功能损伤。4.高糖显著抑制雪旺细胞增殖并促进细胞凋亡；显著降低了lipin-1及NGF的蛋白表达。5.Lipin1高表达后可改善糖尿病大鼠坐骨神经形态和功能。